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elisa試劑盒質(zhì)壁分離實驗技術(shù)原理

時間:2017/2/17閱讀:395
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elisa分析檢測試劑盒質(zhì)壁分離實驗原理:當外界溶液濃度大于細胞液濃度時,根據(jù)擴散作用原理,水分子會由細胞液中滲出到外界溶液中,通過滲透作用失水;由于細胞壁和原生質(zhì)層的伸縮性不同,細胞壁伸縮性較小,而原生質(zhì)層伸縮性較大,從而使二者分開;反之,外界溶液濃度小于細胞液濃度,則細胞通過滲透作用吸水,分離后的質(zhì)和壁又復原。
質(zhì)壁分離實驗目的要求:1.初步學會觀察植物細胞質(zhì)壁分離和復原的方法;2.理解植物細胞發(fā)生質(zhì)壁分離和復原的原理。
重點難點:1.初步掌握植物細胞質(zhì)壁分離和復原的實驗方法;2.臨時裝片的制作;3.低倍顯微鏡的使用。實驗器材:紫色洋蔥的鱗片葉、刀子、鑷子、滴管、載玻片、蓋玻片、吸水紙、顯微鏡;質(zhì)量濃度為0.3g/mL的蔗糖溶液或質(zhì)量分數(shù)為30%的蔗糖溶液、清水。
質(zhì)壁分離 plasmolysis 把液泡發(fā)育良好的植物細胞浸在高滲溶液中時,原生質(zhì)收縮而和細胞壁分離,此現(xiàn)象稱為質(zhì)壁分離。由于細胞膜與液胞膜的半透性,在高滲液中細胞液脫水而膨壓下降,不久就呈現(xiàn)質(zhì)壁分離的臨界狀態(tài)(此時膨壓為0)。若進一步脫水,原生質(zhì)體收縮同細胞壁分離,當細胞液的滲透壓與外液相等時,便停止收縮。把此時所用的溶液稱為質(zhì)壁分離液。作為分離液,細胞膜對其溶質(zhì)必須具有半透性,分子量較大的非電解質(zhì)(如糖)或溶解度高的中性鹽常被用作分離液。如用對細胞膜和細胞壁吸附力強的Ca2+作為分離液,則整個原生質(zhì)體輪廓向內(nèi)凹陷而引起凹形質(zhì)壁分離。如果用吸附力弱的K 和Na 作為分離液,則向外凸出而出現(xiàn)凸形質(zhì)壁分離,通常把細胞浸入分離液中就出現(xiàn)凹形分離,隨著時間推移則凹形部位減弱,zui后整個原生質(zhì)體呈現(xiàn)凸形分離狀態(tài),至此所需的時間稱為質(zhì)壁分離時間。此外用K+ ,Na+ 、Li+,則細胞膜的透性增高,由于離子滲入細胞質(zhì)的結(jié)果,細胞質(zhì)膨脹而粘性減少,細胞壁與液胞被壓迫,而原生質(zhì)集中于細胞分離的一端,有如著冠狀態(tài),這種現(xiàn)象稱為冠狀質(zhì)壁分離。elisa分析檢測試劑盒利用質(zhì)壁分離,可以測出水與溶質(zhì)的透性(原生質(zhì)測定法),此外如把質(zhì)壁分離的細胞壁切斷,可取出原生質(zhì)體。
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