大鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
HRP的制備
1).水提取：稱取5kg用水沖刷干凈的鮮辣根(辣根皮中亦含有豐富的HRP)，用菜刀切成小碎塊，在絞肉機(jī)中絞碎1～2次。碎渣漿用1倍體積的水低溫下攪拌提取過(guò)夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干機(jī)(或離心機(jī))甩干，收集濾液，碎渣再用1/4倍體積水浸泡提取1次，合并2次濾液，測(cè)得總體積。抗體
2).硫酸銨分級(jí)分離：在不斷攪拌下，每1000mL濾液中慢慢加入226g硫酸銨粉末(相當(dāng)于0.40飽和度，0℃)，大約在1~2h內(nèi)加完，置冷室中放置過(guò)夜。次日將上清液小心地用虹吸管移出，下面混濁液以3 000r/min離心15min，棄沉淀，合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸銨粉末(0.8飽和度)隨加隨攪拌，當(dāng)硫酸銨全部溶解后，置冷室過(guò)夜。次日，虹吸出上清液，沉淀部分在冰凍離心機(jī)中以13000r/min離心20min，棄去上清液，收集沉淀。將沉淀懸浮于100~150mL蒸餾水中(加水量要使沉淀全部溶解為止)，分裝于透析袋內(nèi)，放在流動(dòng)自來(lái)水中進(jìn)行透析1～2天，直到硫酸銨透析完畢為止(可用5%乙酸鋇溶液或奈氏試劑進(jìn)行檢查)。然后改換成用蒸餾水透析，中間更換2~3次，用0.1mol/L硝酸銀溶液檢查透析外液無(wú)氯離子為止。將透析液合并，在冰凍離心機(jī)中以4 000r/min離心15min，棄去沉淀，量上清液的體積。
3).丙酮分級(jí)分離：將上清液倒入燒杯并置冰鹽浴中，在不斷攪拌下，用細(xì)滴管沿杯壁加入1倍體積預(yù)冷至-15℃的丙酮，放置片刻，在冰凍離心機(jī)中以4000r/min離心15min，棄去沉淀。上清液再加入0.8體積(按原上清液體積)-15℃丙酮，(操作同上)，靜置后，在冰凍離心機(jī)中離心收集沉淀。將沉淀溶于少量蒸餾水中，透析除去丙酮?？傻肦Z值近于1的酶溶液。
4).精制：將上步酶液適當(dāng)稀釋，滴加1mol/L硫酸鋅溶液，使酶液中鋅離子濃度為10 -3 mol/L，5 000r/min離心10min，得上清液。再將沉淀用少量蒸餾水洗滌，離心，洗液與清液合并，分裝于透析袋內(nèi)，用水透析除鹽，用微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)行真空冰凍干燥(約得20mg)，產(chǎn)品呈米黃色纖維狀松軟物，HRP產(chǎn)品的RZ值可達(dá)3.0左右，置真空干燥器中低溫保存。
大鼠elisa試劑盒膜聯(lián)蛋白A3(ANXA3)ELISA試劑盒    ，英文名：    ANXA3 ELISA Kit
膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)ELISA試劑盒    ，英文名：    ANXA2 ELISA Kit
膜聯(lián)蛋白A13(ANXA13)ELISA試劑盒    ，英文名：    ANXA13 ELISA Kit
膜聯(lián)蛋白A11(ANXA11)ELISA試劑盒    ，英文名：    ANXA11 ELISA Kit
膜聯(lián)蛋白A10(ANXA10)ELISA試劑盒    ，英文名：    ANXA10 ELISA Kit
膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)ELISA試劑盒    ，英文名：    ANXA1 ELISA Kit
膜輔蛋白(MCP)ELISA試劑盒    ，英文名：    MCP ELISA Kit
免疫缺陷伴血小板減少綜合征蛋白家族成員2(WASF2)ELISA試劑盒    ，英文名：    WASF2 ELISA Kit
免疫缺陷伴血小板減少綜合征蛋白(WASP)ELISA試劑盒    ，英文名：    WASP ELISA Kit
免疫球蛋白樣EGF樣域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA試劑盒    ，英文名：    Tie1 ELISA Kit
免疫球蛋白超家族成員16(IGSF16)ELISA試劑盒    ，英文名：    IGSF16 ELISA Kit
免疫球蛋白λ(Igλ)ELISA試劑盒    ，英文名：    Igλ ELISA Kit
免疫球蛋白κ(Igκ)ELISA試劑盒    ，英文名：    Igκ ELISA Kit
免疫球蛋白J鏈(IgJ)ELISA試劑盒    ，英文名：    IgJ ELISA Kit
免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA試劑盒    ，英文名：    IgG2 ELISA Kit
免疫球蛋白A2(IgA2)ELISA試劑盒    ，英文名：    IgA2 ELISA Kit
免疫球蛋白A1(IgA1)ELISA試劑盒    ，英文名：    IgA1 ELISA Kit
密封蛋白(OCLN)ELISA試劑盒    ，英文名：    OCLN ELISA Kit
糜蛋白酶原B2(CTRB2)ELISA試劑盒    ，英文名：    CTRB2 ELISA Kit
糜蛋白酶原B1(CTRB1)ELISA試劑盒    ，英文名：    CTRB1 ELISA Kit
鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(MAGT1)ELISA試劑盒    ，英文名：    MAGT1 ELISA Kit
酶原粒蛋白16同源物B(ZG16B)ELISA試劑盒    ，英文名：    ZG16B ELISA Kit
錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1)ELISA試劑盒    ，英文名：    ANKRD1 ELISA Kit
毛狀樣蛋白1(COTL1)ELISA試劑盒    ，英文名：    COTL1 ELISA Kit
毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變因子(ATM)ELISA試劑盒    ，英文名：    ATM ELISA Kit
毛透明蛋白(TCHH)ELISA試劑盒    ，英文名：    TCHH ELISA Kit
貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)ELISA試劑盒    ，英文名：    CECR1 ELISA Kit
脈周蛋白1(PPHLN1)ELISA試劑盒    ，英文名：    PPHLN1 ELISA Kit
麥芽糖酶糖化酶(MGA)ELISA試劑盒    ，英文名：    MGA ELISA Kit
氯離子通道輔助蛋白1(CLCA1)ELISA試劑盒    ，英文名：    CLCA1 ELISA Kit
氯化物細(xì)胞內(nèi)通道蛋白1(CLIC1)ELISA試劑盒    ，英文名：    CLIC1 ELISA Kit
絡(luò)絲蛋白(RL)ELISA試劑盒    ，英文名：    RL ELISA Kit
卵質(zhì)酶2(OVCH2)ELISA試劑盒    ，英文名：    OVCH2 ELISA Kit
卵質(zhì)酶1(OVCH1)ELISA試劑盒    ，英文名：    OVCH1 ELISA Kit
卵泡抑素樣蛋白1(FSTL1)ELISA試劑盒    ，英文名：    FSTL1 ELISA Kit大鼠elisa試劑盒