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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司資料大小
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107次TSZelisa試劑盒處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面
(1)要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的人ELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
(2)樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
(3)血清標(biāo)本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存,應(yīng)在-70℃以下。
(4)冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,人ELISA檢測(cè)試劑盒凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
(5)標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)中的操作要點(diǎn)
1、加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。 加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
2、標(biāo)本的采取和保存
可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來,在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑。
3、試劑的準(zhǔn)備
按Elisa試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA試劑盒ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。
4、保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。
TSZelisa試劑盒牛布魯氏桿菌抗體(IgM)ELISA Kit 英文名: Bovine brucella antibody(IgM)ELISA kit
牛布魯氏桿菌抗體(IgG)ELISA Kit 英文名: Bovine Brucella antibody IgG ELISA kit
牛補(bǔ)體片斷(C)ELISA Kit 英文名: Bovine complement fragment ,C ELISA kit
牛丙二酸單酰輔酶A(malonyl CoA)ELISA Kit 英文名: Bovine malonyl coenzyme A ELISA kit
牛丙二醛(MDA)ELISA Kit 英文名: Bovine Malondialdehyde,MDA ELISA Kit
牛表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA Kit 英文名: Bovine Epithelial growth factor,EGF ELISA Kit
牛白三烯B4(LT-B4)ELISA Kit 英文名: Bovine leukotriene B4,LT-B4 ELISA kit
牛白介素8(IL-8)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 8,IL-8 ELISA Kit
牛白介素6(IL-6)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
牛白介素5(IL-5)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 5,IL-5 ELISA Kit
牛白介素4(IL-4)ELISA Kit 英文名: Bovine interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
牛白介素2受體(IL-2R)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA kit
牛白介素22(IL22)ELISA Kit 英文名: Bovine interleukin 22,IL22 ELISA kit
牛白介素2(IL-2)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit
牛白介素1β(IL-1β)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 1β,IL- 1β ELISA kit
牛白介素17(IL-17)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit
牛白介素12(IL-12)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 12,IL-12 ELISA Kit
牛白介素10(IL-10)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit
牛白介素1(IL-1)ELISA Kit 英文名: Bovine Interleukin 1,IL-1 ELISA Kit
牛γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit 英文名: Bovine Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
牛γ氨基丁酸(GABA)ELISA Kit 英文名: Bovine Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit
牛β-乳球蛋白(β-LG)(過敏原Bosd5)(LGB)ELISA Kit 英文名: Bovine beta-lactoglobulin(Beta-LG)(allergen Bosd5)(LGB)ELISA kit
牛β羥基丁酸脫氫酶(β-HBDH)ELISA Kit 英文名: Bovine β-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,β-HBDH ELISA Kit
牛β羥丁酸(βOHB)ELISA Kit 英文名: Bovine Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA KitTSZelisa試劑盒
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