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147次大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
8.0 U/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
4.0 U/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2.0 U/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
1.0 U/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
0.5 U/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。
遺傳霉素 (G418) 干粉 100mg 非凍型組織 RNA 保存液 250mL
潮霉素 B 干粉 250mg 非凍型血液 RNA 保存液 10mL
甲酰胺,PCR 級 5mL 非凍型血液 RNA 保存液 100mL
嘌呤霉素干粉 25mg 冷凍型血液 RNA 保存液 100mL
β- 巰基乙醇,電泳級 1.5mL 非凍型細菌 RNA 保存液 100mL
非凍型細菌 RNA 保存液 250mL
PCR 優(yōu)化試劑盒 1套 非凍型拭子病毒保存液 100mL
病毒沉淀劑 100mL
水樣病毒沉淀劑 10 次
電泳級丙烯酰胺溶液 ( 干粉型 ) 200mL 動物 RNAout(TRIzol) 100mL
動物 RNAout(TRIzol) 250mL
SDS-PAGE 濃縮膠配膠液 500mL 柱式動物 RNAout 50 次
SDS-PAGE 分離膠配膠液 500mL 柱式動物 RNAout 250 次
電泳級尿素 100g 大提柱式動物 RNAout 5次
DNA 尿素 -PAGE 上樣液 1.5mL 柱式動物 RNA-DNA 雙提試劑盒 50 次
DNA 尿素 -PAGE 上樣液 10mL 血液 RNAout 50 次
大鼠多酚氧化酶ELISA試劑盒
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