ELISA試劑盒的結(jié)果判定分為定性和定量?jī)煞N ，在間接法和夾心法ELSIA中，陽(yáng)性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中則相反，陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。那么兩類結(jié)果如何判斷呢？
一.間接法和夾心法
這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性，顯色清晰者為陽(yáng)性。但在ELSIA中，正常人血清反應(yīng)后?？沙霈F(xiàn)呈色的本底，此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異，因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí)，更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。
目視法簡(jiǎn)捷明了，但頗具主觀性。在條件許可下，應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值，這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本（sample，S）、陽(yáng)性對(duì)照（P）、和陰性對(duì)照（N）的吸光值，然后進(jìn)行計(jì)算。計(jì)算方法有多種，大致可分為陽(yáng)性判定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類。
1.陽(yáng)性判定值 
陽(yáng)性判定值（cut-off value）一般為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù)，以此作為判斷結(jié)果陽(yáng)性或陰性的標(biāo)準(zhǔn)。
用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定，試劑的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化，陽(yáng)性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合一定的規(guī)格，須配用精密的儀器，并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽(yáng)性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過(guò)對(duì)大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)而得到的?，F(xiàn)舉某種檢測(cè)HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，陽(yáng)性對(duì)照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后，先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)（NCX）和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)（PCX），兩個(gè)平均數(shù)的差（P-N）必須大于一個(gè)特定的數(shù)值（例0.400），試驗(yàn)才有效。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，而已另兩個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算NCX；如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上范圍，則該次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算：陽(yáng)性判定值=NCX+0.05，標(biāo)本A值＞陽(yáng)性判定值的為陽(yáng)性，小于陽(yáng)性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是，式中0.05為該試劑盒的常數(shù)，只適合于該特定條件下，而不是對(duì)各種試劑均可通用。
根據(jù)以上敘述可以看出，在這種方法中陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照也起到試驗(yàn)的質(zhì)控作用，試劑變質(zhì)和操作不當(dāng)均會(huì)產(chǎn)生"試驗(yàn)無(wú)效"的后果。
標(biāo)本/陰性對(duì)照比值 
ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)條件（包括試劑）較難保證恒定的情況下，ELISA試劑盒這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的A值后，計(jì)算S/N值。也有寫作P/N的，ELISA試劑盒這里的P不代表陽(yáng)性（positive），而是病人（patient）的縮寫，不應(yīng)誤解。為避免混淆，更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)多為各種測(cè)定所沿用。實(shí)際上每一測(cè)定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是，N所代表的陰性對(duì)照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對(duì)照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此，這類試劑盒規(guī)，如N<0.05（或其他數(shù)值），則按0.05計(jì)算，否則將出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
二.競(jìng)爭(zhēng)法
在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中，陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。陰性呈色的強(qiáng)度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競(jìng)爭(zhēng)抑制物的量，一般調(diào)節(jié)陰性對(duì)照的吸光度在1.0-1.5之間，此時(shí)反應(yīng)zui為敏感。
競(jìng)爭(zhēng)法ELISA不易用自視判斷結(jié)果，因肉眼很難辨別弱陽(yáng)性反應(yīng)與陰性對(duì)照的顯色差異，一般均用比色計(jì)測(cè)定，讀出S、P和N的吸光值。計(jì)算方法主要也有兩種，即陽(yáng)性判定值法和抑制率法。
1.陽(yáng)性判定值法
與間接法和夾心法中的陽(yáng)性判定值法基本相同，但在計(jì)算公式中引入陽(yáng)性對(duì)照A值，現(xiàn)舉某種檢測(cè)抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對(duì)照為不含抗HBc的復(fù)鈣人血漿，陽(yáng)性對(duì)照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗(yàn)設(shè)2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照和3個(gè)陰性對(duì)照。測(cè)得A值后，先計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均值（NCX）和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)（PCX），兩個(gè)平均數(shù)的差（N-P）必須大于一個(gè)特定的數(shù)值（例如0.300）,試驗(yàn)才有效。3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)小于2.000，而且應(yīng)≥0.5×NCX并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范圍，則棄去，而以另2個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算×NCX；如有2個(gè)陰性對(duì)照A超出以上范圍，則該次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算：陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX，標(biāo)本A值≤陽(yáng)性判定值的反應(yīng)為陽(yáng)性，A＞陽(yáng)性判定值的反應(yīng)為陰性。 
2.抑制率法 
ELISA試劑盒抑制率表示標(biāo)本在競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合中標(biāo)本對(duì)陰性反應(yīng)顯色的抑制程度，按下式計(jì)算：
抑制率（%）= （陰性對(duì)照A值-標(biāo)本A值）×/陰性對(duì)照A值，一般規(guī)定抑制率≥50%為陽(yáng)性，＜50%為陰性。
無(wú)水磷酸三鈉    英文名(EN)：    Sodium phosphate tribasic,96%     No.：    7601-54-9    規(guī)格(SP)：    100G    類別(Key)：    通用試劑
無(wú)水硫代硫酸鈉    英文名(EN)：    Sodium thiosulfate,≥98.0%     No.：    7772-98-7    規(guī)格(SP)：    250G    類別(Key)：    通用試劑
甲醛合次硫酸氫鈉    英文名(EN)：    Hydroxymethanesulfinic acid monosodium...     No.：    6035-47-8    規(guī)格(SP)：    100G    類別(Key)：    通用試劑
2-甲酰苯磺酸鈉    英文名(EN)：    2-Formylbenzenesulfonic acid sodium sa...     No.：    1008-72-6    規(guī)格(SP)：    25G    類別(Key)：    通用試劑
無(wú)水四硼酸鈉    英文名(EN)：    Sodium tetraborate,99%     No.：    1330-43-4    規(guī)格(SP)：    50G    類別(Key)：    通用試劑
紅鋁溶液    英文名(EN)：    SBAH,≥60 wt. %     No.：    22722-98-1    規(guī)格(SP)：    50G    類別(Key)：    通用試劑
雙(*基硅烷基)氨...    英文名(EN)：    Sodium bis(trimethylsilyl)amide,98%     No.：    1070-89-9    規(guī)格(SP)：    1G    類別(Key)：    通用試劑
雙(2-乙己基)磺基丁...    英文名(EN)：    Aerosol OT,98%     No.：    577-11-7    規(guī)格(SP)：    25G    類別(Key)：    通用試劑
硫氫化鈉水合    英文名(EN)：    Sodium hydrosulfide hydrate,≥90%     No.：    207683-19-0    規(guī)格(SP)：    100G    類別(Key)：    通用試劑
三乙酰氧基硼氫化鈉    英文名(EN)：    Sodium triacetoxyborohydride,95%     No.：    56553-60-7    規(guī)格(SP)：    5G    類別(Key)：    通用試劑
3-巰基-1-丙烷磺酸鈉    英文名(EN)：    Sodium 3-mercapto-1-propanesulfonate,90%     No.：    17636-10-1    規(guī)格(SP)：    25G    類別(Key)：    通用試劑
核黃素磷酸鈉    英文名(EN)：    Riboflavin Sodium phosphate (HPLC, ≥7...     No.：    130-40-5    規(guī)格(SP)：    25MG    類別(Key)：    通用試劑
無(wú)水鉻酸鈉    英文名(EN)：    Sodium chromate, anhydrous,98%     No.：    7775/11/3    規(guī)格(SP)：    100G    類別(Key)：    通用試劑
三偏磷酸鈉    英文名(EN)：    Trisodium trimetaphosphate,≥95%     No.：    7785-84-4    規(guī)格(SP)：    500G    類別(Key)：    通用試劑
偏硼酸鈉四水    英文名(EN)：    Sodium metaborate tetrahydrate,≥99%     No.：    10555-76-7    規(guī)格(SP)：    250G    類別(Key)：    通用試劑
偏硅酸鈉五水    英文名(EN)：    Sodium metasilicate pentahydrate,≥95.0%     No.：    10213-79-3    規(guī)格(SP)：    250G    類別(Key)：    通用試劑
高氯酸鈉一水    英文名(EN)：    Sodium perchlorate monohydrate (HPLC,...     No.：    7791/7/3    規(guī)格(SP)：    50G    類別(Key)：    通用試劑
叔丁醇鈉    英文名(EN)：    Sodium tert-butoxide,97%     No.：    865-48-5    規(guī)格(SP)：    25G    類別(Key)：    通用試劑

ELISA試劑盒