ELISA試劑盒技術(shù)流程ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號。結(jié)合在固相載體外表的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶符號的抗原或抗體既保存其免疫學(xué)活性，又保存酶的活性。在測守時，ELISA試劑盒受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體外表的抗原或抗體起反響。用洗刷的方法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分隔。再參加酶符號的抗原或抗體，也經(jīng)過反響而結(jié)合在固相載體上。此刻固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈必定的份額。參加酶反響的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)品，產(chǎn)品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。因為酶的催化功率很高，間接地擴大了免疫反響的成果，使測定方法到達(dá)很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。
ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu)：
1、 血清：操作過程中防止任何細(xì)胞影響。運用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。搜集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞敏捷小心腸別離。
2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 安排勻漿：將安排參加適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、 保存：如果樣品不當(dāng)即運用，應(yīng)將其分紅小部分-70℃保存，防止重復(fù)冷凍。盡可能的不要運用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱凍結(jié)。應(yīng)在室溫下凍結(jié)并確保樣品均勻地充沛凍結(jié)。
ELISA試劑盒操作注意事項
1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽闡明書貯存，運用前康復(fù)到室溫。稀稀往后的規(guī)范品應(yīng)丟掉，不行保存。
2．試驗中不必的板條應(yīng)當(dāng)即放回包裝袋中，密封保存，防止蛻變。
3．不必的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前運用。
4．運用一次性的吸頭防止穿插污染，汲取停止液和底物A、B液時，防止運用帶金屬部分的加樣器。
5．運用潔凈的塑料容器裝備洗刷液。運用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6．洗刷酶標(biāo)板時應(yīng)充沛拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反響孔中吸水。
7．底物A應(yīng)蒸發(fā)，防止*翻開蓋子。底物B對光敏感，防止*露出于光下。防止用手觸摸，有毒。試驗完成后應(yīng)當(dāng)即讀取OD值。
8．參加試劑的次序應(yīng)共同，以確保一切反響板孔溫育的時刻一樣。
9．依照闡明書中標(biāo)明的時刻、加液的量及次序進(jìn)行溫育操作。
