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公司動(dòng)態(tài)

ELISA試劑盒包被抗原的選擇

閱讀:285發(fā)布時(shí)間:2017-1-16

ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化:
在這一過(guò)程中,一般情況下有三次加樣,它們分別是加標(biāo)本,加酶聯(lián)絡(luò)物,加底物。
小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物,由于分子量太小,一般難于直接吸附在酶標(biāo)板上,一般都先使其與無(wú)關(guān)蛋白質(zhì),比如BSA等偶聯(lián),偶聯(lián)物吸附于固相載體上。
凍住血清融解后,蛋白質(zhì)有些濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上劇烈振蕩。
也可在板孔中參與稀釋液,再在其參與血清標(biāo)本,然后在微型轟動(dòng)器上轟動(dòng)1分鐘以確保混和。
一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,逾越一星期測(cè)定的需低溫冰存。
ELISA試劑盒包被條件的優(yōu)化:
包被液的選擇:一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,假設(shè)包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話(huà),也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝結(jié)、縮短后即可取得。
包被濃度的選擇:包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)改變,一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml,要明晰關(guān)于特定包被抗原的zui適包被濃度需求經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)判定。
包被溫度的選擇:一般是4-8度條件下放置一個(gè)黑夜或許37度保溫2小時(shí),我們劇烈主張4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的堅(jiān)持。
ELISA試劑盒包被抗原的選擇:可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類(lèi)。


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