ELISA實(shí)驗(yàn)看似簡(jiǎn)略，其實(shí)不然。記住從前一個(gè)同學(xué)*次做ELISA實(shí)驗(yàn)，跟我說(shuō)，ELISA實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)直太簡(jiǎn)略了，到第2次在次做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)分，他驚奇了，說(shuō)效果不同怎樣這么大（同一份標(biāo)本），第三次的時(shí)分，他抉擇仔細(xì)的做一次，搶奪做到同一份標(biāo)本，這次讓他感受到ELISA并不是那么簡(jiǎn)略，發(fā)覺(jué)其實(shí)挺難的。今日的文章中為我們敘說(shuō)一些ELISA實(shí)驗(yàn)中的小技巧，希望對(duì)我們有所協(xié)助！
1.操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗刷的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)垂直參與標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗潔凈，避免污染，加樣次第要與說(shuō)明書(shū)一起，否則可導(dǎo)致效果差錯(cuò)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。
3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗刷次數(shù)不要超越說(shuō)明書(shū)*的洗刷次數(shù)，洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)逗留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流，構(gòu)成孔問(wèn)污染，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
4.要保證加液量一起ELISA試劑盒我們?cè)谶\(yùn)用時(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量禁絕，構(gòu)成顯色不一致，判別差錯(cuò)。
5.顯色液量不可過(guò)多加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過(guò)多，避免顯色過(guò)強(qiáng)。
ELISA試劑盒的影響要素應(yīng)選用有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào)，質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品，不能圖廉價(jià)，忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi)，在運(yùn)用時(shí)先平衡至室溫，不同批號(hào)的試劑組分不宜穿插運(yùn)用。試劑打開(kāi)后要在一周內(nèi)用完，剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先查看是否蛻變，顯色劑如被污染變色將構(gòu)成悉數(shù)顯色，導(dǎo)致差錯(cuò)效果。