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ELISA試劑盒因為凈化進程中引入的溶劑,可能會下降待測組分的濃度或許不適宜直接剖析,需求去除悉數(shù)有機溶劑。即前處理進程中把樣本在60℃氮氣下吹干,再用復溶液溶解枯燥殘留物。
濃縮方法:氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
留意:
1在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)攪擾。
2在吹樣本時,針頭應在液面上空,防止與樣本觸摸,防止發(fā)生穿插污染。
3樣本吹干后應當即取下,防止吹的時刻過長,影響終究檢測成果。
4不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)
期不同,提倡待樣本回到室溫后當即復溶。
5凈化
通過提取的待測組分中一般含有一些會攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質(zhì)或許是含有與待測物結構類似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的進程,我們稱為ELISA試劑盒中樣本的凈化。
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反響孔中加0.1ml4℃過一夜。次日,ELISA試劑盒棄去孔內(nèi)溶液,用洗刷緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗刷,下同)。
2.加樣:加必定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反響孔中,置37℃孵育1小時。然后洗刷。(一起做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3.加酶標抗體:于各反響孔中,參加新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,ELISA試劑盒洗刷。
4.ELISA試劑盒加底物液顯色:于各反響孔中參加暫時制造的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
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