錢美圓，仇文軍，徐波
應(yīng)用技術(shù)研究中心
正相分離是分離純化合成有機小分子樣品zui為常用的分離方法，在正相分離模式中，采用極性較強的固定相與極性較弱的流動相作為組合，利用樣品分子在這兩相中分配比的差異對樣品和雜質(zhì)進行分離。薄層液相色譜（Thin layer chromatography，以下簡稱TLC）是廣大有機合成人員在進行正相分離實驗時普遍采用的分離條件探索方法，根據(jù)樣品在TLC板上的遷移率計算出相應(yīng)的比移值Rf，然后依據(jù)樣品中各組分Rf值的差異以及上樣量，研究人員憑借經(jīng)驗確定所需要的Flash柱的類型，并在后續(xù)分離實驗中不斷優(yōu)化洗脫梯度參數(shù)，zui終完成對樣品的分離制備。
上述實驗流程是一個典型的經(jīng)驗依賴性很強的工作，需要研究人員具備豐富的實踐經(jīng)驗，對于大多數(shù)剛剛接觸有機合成和Flash制備色譜的實驗菜鳥來說，這里面的“套路”顯得頗為高深。那么，有沒有一種簡單易學(xué)、便于快速上手的實驗裝置呢？答案是肯定的。今天就為大家介紹來自常州三泰科技的智能快速液相制備色譜系統(tǒng)——SepaBeanTM machine，在版本的SepaBean控制軟件中，整合了分離方法自動推薦的功能，可以根據(jù)樣品量以及樣品的TLC信息自動推薦適合的分離柱，并自動生成經(jīng)過優(yōu)化的洗脫梯度條件，從而大大簡化了實驗流程，提高了廣大研究人員的工作效率。下面僅以一例簡單介紹上述功能的實現(xiàn)方法。
首先配制標(biāo)準(zhǔn)樣品：稱取苯甲酸甲酯5.0 g，鄰苯二甲酸二甲酯10.0 g，鄰苯二甲酸二乙酯10.0 g，將上述三種樣品混合后溶于20 mL乙酸乙酯，待樣品充分溶解后加入正己烷，稀釋至100 mL。
然后在TLC板上進行樣品點板，展開劑為石油醚/乙酸乙酯（PE : EA = 10 : 1），得到如圖一所示的點板結(jié)果，并計算出各樣品組分的Rf值。
圖1. 混合物樣品的TLC點板結(jié)果
接下來在SepaBean控制軟件中輸入樣品的TLC信息，選擇所用的展開劑及比例，并輸入樣品各組分的Rf值，如圖2所示。
圖2. 在SepaBean控制軟件中輸入樣品的TLC信息
圖3. SepaBean控制軟件中的分離方法設(shè)置頁面
待樣品的TLC信息輸入完成后，進入下一步的分離設(shè)置，如圖3所示?？梢钥吹较疵撎荻纫呀?jīng)由軟件自動生成。輸入樣品的上樣量后，在分離柱選擇菜單中將出現(xiàn)推薦的分離柱，用戶根據(jù)樣品的性質(zhì)可以自行決定是否從中選擇。對于分離難度不高的樣品，軟件推薦的分離柱即可滿足要求。接下來設(shè)置好流速、檢測波長、收集方式、收集試管架類型及收集體積等參數(shù)后，即可開始分離實驗。表1所示為本次制備純化實驗的參數(shù)設(shè)置。
表1. 制備純化實驗參數(shù)設(shè)置
圖4. 混合物樣品的Flash制備分離圖譜
圖4所示即為本次Flash制備純化實驗的分離圖譜，從中可以看出樣品中三個組分均得到了基線分離，表明儀器控制軟件自動生成的洗脫梯度參數(shù)比較合適，用戶僅需一次進樣分離實驗即可獲得滿意的結(jié)果，無需再進行繁瑣的分離條件優(yōu)化工作，從而大大提高了工作效率，并且節(jié)省了大量寶貴的時間，降低了溶劑消耗。
常州三泰科技有限公司推出的SepaBeanTMmachine是一臺智能化快速液相制備色譜系統(tǒng)，具有操作便捷、易于使用、內(nèi)置化學(xué)知識數(shù)據(jù)庫、自我學(xué)習(xí)及安全的信息共享等特點，相關(guān)特性已申請了一系列發(fā)明或?qū)嵱眯滦汀榱俗寖x器更加智能化且便于使用，我們還將開發(fā)一系列新功能，敬請期待！
