本試劑僅供研究使用 標(biāo)本：組織勻漿
試驗(yàn)原理：
Dopamine試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知Dopamine濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將Dopamine和*標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Dopamine的濃度呈比例關(guān)系。
試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份（2-8℃保存） | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48人份酶標(biāo)板 | 1塊板（96T） | 半塊板（48T） | 即用型 |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | 即用型 |
標(biāo)準(zhǔn)品：1600ng/L | 1瓶（0.6ml） | 1瓶（0.3ml） | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀 |
空白對(duì)照 | 1瓶（1.0ml） | 1瓶（0.5ml） | 即用型 |
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 | 1瓶（5ml） | 1瓶（2.5ml） | 即用型 |
*標(biāo)記的抗Dopamine抗體 | 1瓶（6ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶（10ml） | 1瓶（5.0ml） | 即用型 |
洗滌緩沖液 | 1瓶（20ml） | 1瓶（10ml） | 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋 |
底物A | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
底物B | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
終止液 | 1瓶（6.0ml） | 1瓶（3.0ml） | 即用型 |
標(biāo)本稀釋液 | 1瓶（12ml） | 1瓶（6.0ml） | 即用型 |
自備材料
- 蒸餾水。
- 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
- 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
- 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
- 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
- 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
操作注意事項(xiàng)
- 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
- 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
- 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
- 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
- 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
- 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
- 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
- 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
- 按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
- 血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
- 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
- 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
- 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
- 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
會(huì)員1.png)
