目的就是為了研制人可溶性白細(xì)胞分化抗原28（sCD28）ELISA試劑盒的靈敏度、特異性和穩(wěn)定性，并探討其臨床應(yīng)用意義。方法取識(shí)別不同抗原位點(diǎn)的單抗8G8和2D5分別作為包被單抗和檢測(cè)單抗，建立雙單抗夾心-sCD28酶聯(lián)免疫檢測(cè)法（sCD28- ELISA），并繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。同時(shí)，測(cè)定36名健康人、23例系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、38例類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）和62例Grave病患者血 清中sCD28含量。結(jié)果研制的sCD28試劑盒zui低檢測(cè)下限為0．3ng／ml，具有良好線性關(guān)系的檢測(cè)范圍是0．5～16．0ng／ml；8G8單抗 包被測(cè)定板后置4℃冰箱保存180d，加入可溶性CD28-Ig重組蛋白的回收率在93％～109％之間。SLE、RA和Grave病患者血清中 sCD28含量分別為0．9～7．3ng／ml、0．3～6．8ng／ml、0．2～3．5ng／ml，明顯高于健康人（0～1．1ng／ml，P <0．01）。結(jié)論自制的sCD28試劑盒，能準(zhǔn)確測(cè)定樣本中sCD28含量，可為sCD28分子基礎(chǔ)研究和臨床疾病輔助診斷、療效評(píng)估及預(yù)后判斷提供有價(jià)值的生物學(xué)參數(shù)，具有良好應(yīng)用前景。
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