組織培養(yǎng)過(guò)程中，外植體生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子，主要是由培養(yǎng)基供應(yīng)的。因此，培養(yǎng)基中應(yīng)包括植物生長(zhǎng)必需的16種營(yíng)養(yǎng)元素和某些生理 活性物質(zhì)。所有這些物質(zhì)，可概括為5大類(lèi)：
 

1．無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物
    植物生長(zhǎng)必須的有13種元素：氮(N)、磷(P)、鉀(K)、鈣(Ca)、鎂(Mg)、硫(S)、鐵(Fe)、硼(B)、錳(Mn)、銅(Cu)、鋅(Zn)、鉬(MO)、氯(Cl)。 前六種屬大量元素，后七種屬微量元素。培養(yǎng)基的各種鹽類(lèi)中均含有上述這些元素。
    無(wú)機(jī)氮可以兩種形式供應(yīng)，即硝態(tài)氮和銨態(tài)氮。有些培養(yǎng)基以硝態(tài)氮為主，另一些以銨態(tài)氮為主，多數(shù)二者兼而有之。鐵往往以無(wú)機(jī)鐵供應(yīng)，如 硫酸亞鐵，為了防止沉淀，目前皆用螯合鐵，即硫酸亞鐵加乙二胺四乙酸鈉配成。
 

2．有機(jī)物質(zhì)
    主要有兩類(lèi)：一是作為有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為植物細(xì)胞提供碳、氫、氧、氮等必要元素，如糖類(lèi)(蔗糖、葡萄糖和果糖)、氨基酸及其酰胺類(lèi)(如甘氨 酸、天門(mén)冬酰胺、谷氨酰胺)；另一類(lèi)是一些生理活性物質(zhì)，在植物代謝中起一定作用，如硫胺素(B1)、吡哆醇(B6)、煙酸、生物素、肌醇、單核甘 酸及其堿基(如腺嘌呤等)。
 

3．植物生長(zhǎng)ci激物質(zhì)
    主要加入植物天然的五類(lèi)激素物質(zhì)及其人工合成的類(lèi)似生長(zhǎng)激素物質(zhì)，如生長(zhǎng)素中常用的吲哚乙酸、萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸、吲哚丁酸； 細(xì)胞分裂素中常用的有激動(dòng)素、6-芐基氨基嘌呤、玉米素；赤霉素類(lèi)中常用的有赤霉酸；乙烯類(lèi)中常用的有乙烯和乙烯利。
 

4．其他附加物
    這些物質(zhì)不是植物生長(zhǎng)所必需的，但對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有益。 瓊脂(agar)是固體培養(yǎng)基的必要成分，瓊脂是一種由海藻中提取的高分子碳水化合物， 本身并不提供任何營(yíng)養(yǎng)。瓊脂能溶解在熱水中，成為溶膠，冷卻至40℃即凝固為固體狀凝膠。通常所說(shuō)的“煮化”培養(yǎng)基，就是使瓊脂溶解于90℃以 上的熱水。瓊脂條的用量在6—10g／L之間，瓊脂粉的用量在3—4g／L之間若濃度太高，培養(yǎng)基就會(huì)變得很硬，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)難以擴(kuò)散到培養(yǎng)的組織中去 。若濃度過(guò)低，凝固性不好。新買(mǎi)來(lái)的瓊脂先試一下它的凝固力。一般瓊脂以顏色淺、透明度好、潔凈的為上品。瓊脂的凝固能力除與原料、廠 家的加工方式有關(guān)外，還與高壓滅菌時(shí)的溫度、時(shí)間、pH值等因素有關(guān)，長(zhǎng)時(shí)間的高溫會(huì)使凝固能力下降，過(guò)酸過(guò)堿加之高溫會(huì)使瓊脂發(fā)生水解，喪 失凝固能力。時(shí)間過(guò)久，瓊脂變褐，也會(huì)逐漸喪失凝固能力。加入瓊脂的固體培養(yǎng)基與液體培養(yǎng)基相比優(yōu)點(diǎn)在于操作簡(jiǎn)便，通氣問(wèn)題易于解決，便于 經(jīng)常觀察研究等，但它也有不少缺點(diǎn)，如培養(yǎng)物與培養(yǎng)基的接觸(即吸收)面積小，各種養(yǎng)分在瓊脂中擴(kuò)散較慢，影響?zhàn)B分的充分利用，同時(shí)培養(yǎng)物排 出的一些代謝廢物，聚集在吸收表面，對(duì)組織產(chǎn)生毒害作用。市售的各種瓊脂幾乎都含有雜質(zhì)，特別是Ca、Mg及其他微量元素。因此在研究植物組織 或細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)問(wèn)題時(shí)，則應(yīng)避免使用瓊脂?？稍谝后w培養(yǎng)基表面安放一個(gè)無(wú)菌濾紙制成的濾紙橋，然后在濾紙橋上進(jìn)行愈傷組織培養(yǎng)。 
          

    其他替代物，有玻璃纖維、濾紙橋、海綿、脫脂棉、卡拉膠等，總的要求是排出的有害物質(zhì)對(duì)培養(yǎng)材料沒(méi)有影響或影響較小。 
   

    活性炭(active carbon)可以降低組織培養(yǎng)物的有害代謝物濃度，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有利；活性炭為木炭粉碎經(jīng)加工形成的粉沫結(jié)構(gòu)，它結(jié)構(gòu)疏松，孔 隙大，吸水力強(qiáng)，有很強(qiáng)的吸附作用，它的顆粒大小決定著吸附能力、粒度越小，吸附能力越大。溫度低吸附力強(qiáng)，溫度高吸附力減弱，甚至解吸附 。通常使用濃度為0.5—l0g／L。它可以吸附非極性物質(zhì)和色素等大分子物質(zhì)，包括瓊脂中所含的雜質(zhì)，培養(yǎng)物分泌的酚、醌類(lèi)物質(zhì)以及蔗糖在高壓 消毒時(shí)產(chǎn)生的5—羥甲基糖醛及激素等。
          

    抗生物質(zhì)(antibiotic)，包括青霉素、鏈霉素、慶大霉素等，用量在5—20mg/L之間。添加抗生物質(zhì)可防止菌類(lèi)污染，減少培養(yǎng)中材料的損失， 尤其是快速繁殖中，常因污染而丟棄成百上千瓶的培養(yǎng)物，采用適當(dāng)?shù)目股乇憧晒?jié)約人力、物力和時(shí)間。尤其對(duì)大量通氣長(zhǎng)期培養(yǎng)，效果更好。對(duì) 于剛感染的組織材料，可向培養(yǎng)基中注入5%—10%的抗菌素?？股馗饔衅湟志V，要加以選擇試用，也可兩種抗生素混用。但是應(yīng)當(dāng)注意抗生素對(duì) 植物組織的生長(zhǎng)也有抑制作用，可能某些植物適宜用青霉素，而另一些植物卻不大適應(yīng)。值得提醒的是，在工作中不能以為有了抗菌素，而放松滅菌 措施。

 
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