當(dāng)前位置:上海滬鼎生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>L-鳥氨酸乙酯鹽酸鹽實現(xiàn)溯源性目標(biāo)的過程
L-鳥氨酸鹽酸鹽HCL在實現(xiàn)溯源性目標(biāo)過程中,永遠(yuǎn)以患者新鮮標(biāo)本為實驗對象,以方法學(xué)對比試驗方法為驗證手段。滬鼎生物方法學(xué)對比試驗常采用回歸方程進(jìn)行統(tǒng)計分析,假如斜率接近1,截距較小,這意味著實驗室常規(guī)方法對標(biāo)本測定結(jié)果和溯源目標(biāo)參考系統(tǒng)對標(biāo)本檢測結(jié)果非常接近。
L-鳥氨酸鹽酸鹽HCL原則上,吸光度上升的反應(yīng),其試劑空白吸光度越低越好,不能超過一個高限;相反,吸光度下降的反應(yīng),其試劑空白吸光度不能低于一個低限。因此,試劑空白吸光度限值,常作為程序參數(shù)輸入儀器,如經(jīng)核查超限,儀器會自動報警,提示更換試劑。
需要指出的是,還原型輔酶I(或II)等投料量不足或劣質(zhì)的原料,往往需要加大用量,才使“表觀”吸光度上升,湊合過試劑空白核對的“關(guān)”,
L-鳥氨酸鹽酸鹽其后果為如下情況:
1.1 線性范圍變窄 現(xiàn)象:高值測不高。原因:生產(chǎn)試劑時有效成分投料量不足;試劑成份穩(wěn)定性較差。
1.2 靈敏度變低現(xiàn)象:酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降,測定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。原因:試劑底物濃度不足。
1.3 低值偏高 現(xiàn)象:試劑空白的變化曲線(吸光度VS時間)明顯波動。原因:試劑自身不穩(wěn)定,自行分解;工具酶純度不夠,雜酶含量超限,導(dǎo)致干擾作用。
2 樣品信息樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定結(jié)果產(chǎn)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此,應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長或多波長的檢測模式,并在結(jié)果計算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。
3 測定范圍每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍,樣品結(jié)果若超過此范圍,分析儀將顯示結(jié)果超過范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì),應(yīng)更換合格試劑。
4 底物耗盡使用連續(xù)監(jiān)測法、兩點(diǎn)法測定酶活性時,若酶活性非常高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍,監(jiān)測期的吸光度將偏離線性,使測定結(jié)果不可靠。
5 酶的預(yù)活化測定血清中的某些酶,如CK,離體(采血)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巰基(一SH)被氧化造成的。只有通過適當(dāng)?shù)倪€原作用才能重新激活。撫生生物如CK—NAC試劑盒即含有CK活化劑,名為N一乙酰半胱氨酸。實驗研究證明,NAC對血清中已失活的CK活化過程約需180 S。這就是CK測定為什么要延遲時間較長的理論依據(jù)。
在AST,ALT采用IFCC推薦方法測定時需要磷酸吡哆醛預(yù)活化。需要強(qiáng)調(diào):含有活化劑的生化試劑,其測定酶活性的結(jié)果要高些。
6 校準(zhǔn)與結(jié)果溯源性酶的校正:要滿足在同一方法學(xué)、同一測定條件、與理論計算的FACTOR值差異不大,沒有發(fā)現(xiàn)有明顯影響因素,方可進(jìn)行校正。檢驗結(jié)果溯源性,得建立一個可靠的參考系統(tǒng)作為準(zhǔn)確性基礎(chǔ),然后將準(zhǔn)確性轉(zhuǎn)移到常規(guī)方法測定中去,使常規(guī)方法測定結(jié)果可溯源到參考系統(tǒng)所提供的準(zhǔn)確性基礎(chǔ)上來。
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