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人淋巴細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞

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更新時間:2016-06-29 11:58:50瀏覽次數(shù):203次

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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日人淋巴細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞保存到液氮中。
A08317 小鼠睪酮(Testoterone) Mouse Testoterone ELISA Kit 96T/48T
A08318 小鼠游離睪酮(Free-Testoterone) Mouse Free-Testoterone ELISA Kit 96T/48T
A08319 小鼠雄烯二酮(ASD) Mouse Androstenedione ELISA Kit 96T/48T
A08320 小鼠雌三醇Estriol Mouse Estriol ELISA Kit 96T/48T
A08321 小鼠17-羥-孕酮(17-ANP) Mouse 17-ANP ELISA Kit 96T/48T
A08322 小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3) Mouse T3 ELISA Kit 96T/48T
【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞?
用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細胞?;罴毎懦馀_盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A08304 小鼠促卵泡素(FSH) mouse FSH ELISA Kit 96T/48T
A08305 小鼠β-內(nèi)啡肽(Beta-Endorphin) mouse Beta-Endorphin ELISA Kit 96T/48T
A08306 小鼠腦鈉肽 Mouse Nt-proBNP ELISA KIT 96T/48T
A08307 小鼠心鈉肽Pro-ANP(1-98) Mouse Pro-ANP(1-98) ELISA Kit 96T/48T
A08308 小鼠大內(nèi)皮素(BigET) Mouse BigET ELISA Kit 96T/48T
A08309 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1) Mouse Endothelin-1 ELISA Kit 96T/48T
A08310 小鼠降鈣素(CT) Mouse CT ELISA Kit 96T/48T
A08311 小鼠可溶性破骨細胞異化因子(sPANKL) Mouse sPANKL ELISA Kit 96T/48T
A08312 小鼠促甲狀腺素(TSH) Mouse TSH ELISA Kit 96T/48T
A08313 小鼠*(Cortisol) Mouse Cortisol ELISA Kit 96T/48T
A08314 小鼠雌二醇(E2) Mouse Estradiol ELISA Kit 96T/48T
A08315 小鼠去氫表雄酮(DHEA-S) Mouse DHEA-S ELISA Kit 96T/48T
A08316 小鼠孕酮(PROG) Mouse PROG ELISA Kit 96T/48T
 

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