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更新時間:2016-07-29 03:54:32瀏覽次數(shù):260次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞>50000個/瓶裝
【細(xì)胞凍存】將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞保存到液氮中。
A08030 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3β(MIP-3β) Mouse Macrophage Inflammatory Protein-3β,MIP-3β ELISA kit 96T/48T
A08031 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-3α(MIP-3α) Mouse Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α ELISA kit 96T/48T
A08032 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-2(MIP-2) Mouse Macrophage Inflammatory Protein-2(MIP-2)ELISA kit 96T/48T
A08033 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1β( MIP-1β) Mouse Macrophage Inflammatory Protein-1β,MIP-1β ELISA kit 96T/48T
【細(xì)胞株傳代】貼壁細(xì)胞:對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?
用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?;罴?xì)胞排斥臺盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
A08014 小鼠SCF Mouse Stem cell factor,SCF ELISA kit 96T/48T
A08015 小鼠可溶性CD40配體(sCD40L) Mouse Soluble CD40 ligand ELISA Kit 96T/48T
A08016 小鼠抵御素(Rsistin) Mouse Rsistin(m)ELISA kit 96T/48T
A08017 小鼠調(diào)節(jié)活化蛋白(Rantes) Mouse Rantes ELISA kit 96T/48T
A08018 小鼠P-Selectin Mouse P-Selectin ELISA kit 96T/48T
A08019 小鼠Peiotrophin Mouse Peiotrophin ELISA kit 96T/48T
A08020 小鼠血小板源性生長因子(PDGF-AB) Mouse Plaet-Derived Growth Factor,PDGF ELISA kit 96T/48T
A08021 小鼠血小板源性生長因子可溶性受體α ( PDGF sRα) Mouse Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor,PDGF sRα ELISA kit 96T/48T
A08022 小鼠抑瘤素M(OSM) Mouse Oncostatin M,OSM ELISA KIT 96T/48T
A08023 小鼠OPN Mouse Osteopontin,OPN ELISA kit 96T/48T
A08024 小鼠骨保護(hù)素(OPG) Mouse Osteoprotegerin ELISA KIT 96T/48T
A08025 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-4(NT-4) Mouse Neurotrophin-4,NT-4 ELISA KIT 96T/48T
A08026 小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子-3(NT-3) Mouse Neurotrophin-3,NT-3 ELISA kit 96T/48T
A08027 小鼠神經(jīng)生長因子(NGF) Mouse Nerve growth factor,NGF ELISA kit 96T/48T
A08028 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3) Mouse Matrix metalloproteinase-3—MMP-3 ELISA kit 96T/48T
A08029 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2) Mouse Matrix metalloproteinase-2—MMP-2 ELISA kit 96T/48T
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