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更新時(shí)間:2016-06-07 23:12:06瀏覽次數(shù):196次
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【細(xì)胞凍存】將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過(guò)夜。次日惡性黑色素瘤保存到液氮中。
A06624 人淋巴毒素β(LTB)ELISA Kit,48T/96T
A06625 人類白細(xì)胞抗原A(HLA-A)ELISA Kit,48T/96T
A06626 人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA Kit,48T/96T
A06627 人類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA Kit,48T/96T
A06628 人干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA Kit,48T/96T
A06629 人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA Kit,48T/96T
【細(xì)胞株傳代】貼壁細(xì)胞:對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊?,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開(kāi)始,各種目的無(wú)血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì)降解,但是確切的降解率一直沒(méi)有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個(gè)L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?
用無(wú)血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000個(gè)/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?;罴?xì)胞排斥臺(tái)盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
A06597 人NOD樣受體(NLR)ELISA Kit,48T/96T
A06598 人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA Kit,48T/96T
A06599 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA Kit,48T/96T
A06600 人甲酰*(fMet)ELISA Kit,48T/96T
A06601 人*蛋白酶(PRSS)ELISA Kit,48T/96T
A06602 人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA Kit,48T/96T
A06603 人血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA Kit,48T/96T
A06604 人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA Kit,48T/96T
A06605 人抗糖脂抗體(glycolipid)ELISA Kit,48T/96T
A06606 人甘露糖受體(MR)ELISA Kit,48T/96T
A06607 人甘露糖(Mannose)ELISA Kit,48T/96T
A06608 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA Kit,48T/96T
A06609 人肽聚糖(PG)ELISA Kit,48T/96T
A06610 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)ELISA Kit,48T/96T
A06611 人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA Kit,48T/96T
A06612 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA Kit,48T/96T
A06613 人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA Kit,48T/96T
A06614 人重組激活基因1(RAG-1)ELISA Kit,48T/96T
A06615 人重組激活基因2(RAG-2)ELISA Kit,48T/96T
A06616 人DNA結(jié)合蛋白(DBP)ELISA Kit,48T/96T
A06617 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA Kit,48T/96T
A06618 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)ELISA Kit,48T/96T
A06619 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA Kit,48T/96T
A06620 人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA Kit,48T/96T
A06621 人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISA Kit,48T/96T
A06622 人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA Kit,48T/96T
A06623 人淋巴毒素α(LTA)ELISA Kit,48T/96T
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