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更新時間:2016-05-19 16:15:21瀏覽次數(shù):209次
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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日小鼠骨骼肌成纖維細胞保存到液氮中。
A04531 豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit,48T/96T
A04532 大鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit,48T/96T
A04533 兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit,48T/96T
A04534 人骨保護素配體(OPGL)ELISA Kit,48T/96T
A04535 小鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA Kit,48T/96T
A04536 大鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA Kit,48T/96T
A04537 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA Kit,48T/96T
【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞?
用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細胞。活細胞排斥臺盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A04505 大鼠淋巴細胞因子ELISA Kit,48T/96T
A04506 人橋粒芯糖蛋白-1(Dsg-1)ELISA Kit,48T/96T
A04507 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA Kit,48T/96T
A04508 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA Kit,48T/96T
A04509 人補體7(C7)ELISA Kit,48T/96T
A04510 人CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA Kit,48T/96T
A04511 人CCAAT增強子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA Kit,48T/96T
A04512 人蛋白C(Protein C)ELISA Kit,48T/96T
A04513 人蛋白S(Protein S)ELISA Kit,48T/96T
A04514 人蛋白Z(Protein Z)ELISA Kit,48T/96T
A04515 植物吲哚乙酸(IAA)ELISA Kit,48T/96T
A04516 人活化蛋白C(APC) ELISA Kit,48T/96T
A04517 小鼠活化蛋白C(APC)ELISA Kit,48T/96T
A04518 大鼠活化蛋白C(APC)ELISA Kit,48T/96T
A04519 人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA Kit,48T/96T
A04520 植物玉米素核苷(ZR)ELISA Kit,48T/96T
A04521 人Dickkopf 1(DKK1)ELISA Kit,48T/96T
A04522 人羥賴氨酸(Hyl)ELISA Kit,48T/96T
A04523 牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA Kit,48T/96T
A04524 人α-內(nèi)*肽(α-EP)ELISA Kit,48T/96T
A04525 小鼠丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1) ELISA Kit,48T/96T
A04526 人阿立新A(Orexin A)ELISA Kit,48T/96T
A04527 小鼠阿立新A(Orexin A)ELISA Kit,48T/96T
A04528 大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA Kit,48T/96T
A04529 人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit,48T/96T
A04530 小鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit,48T/96T
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