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更新時(shí)間:2016-06-17 21:31:12瀏覽次數(shù):216次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 儀表網(wǎng)人乳腺成纖維細(xì)胞>50000個(gè)/瓶裝
【細(xì)胞凍存】將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日人乳腺成纖維細(xì)胞保存到液氮中。
A04005 人β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA Kit,48T/96T
A04006 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA Kit,48T/96T
A04007 人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA Kit,48T/96T
A04008 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA Kit,48T/96T
A04009 人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA Kit,48T/96T
A04010 小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA Kit,48T/96T
A04011 雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA Kit,48T/96T
【細(xì)胞株傳代】貼壁細(xì)胞:對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個(gè)L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?
用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000個(gè)/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞。活細(xì)胞排斥臺盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
A03976 人流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA Kit,48T/96T
A03977 人α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA Kit,48T/96T
A03978 小鼠α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA Kit,48T/96T
A03979 人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA Kit,48T/96T
A03980 小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA Kit,48T/96T
A03981 大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA Kit,48T/96T
A03982 人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA Kit,48T/96T
A03983 小鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA Kit,48T/96T
A03984 大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA Kit,48T/96T
A03985 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA Kit,48T/96T
A03986 雞透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit,48T/96T
A03987 人透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit,48T/96T
A03988 小鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit,48T/96T
A03989 豬透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit,48T/96T
A03990 大鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit,48T/96T
A03991 兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISA Kit,48T/96T
A03992 人α半乳糖基抗體(Gal)ELISA Kit,48T/96T
A03993 小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA Kit,48T/96T
A03994 人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA Kit,48T/96T
A03995 人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA Kit,48T/96T
A03996 人丁型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA Kit,48T/96T
A03997 人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA Kit,48T/96T
A03998 人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA Kit,48T/96T
A03999 人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA Kit,48T/96T
A04000 人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA Kit,48T/96T
A04001 人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)ELISA Kit,48T/96T
A04002 人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA Kit,48T/96T
A04003 人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)ELISA Kit,48T/96T
A04004 人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)ELISA Kit,48T/96T
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