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皮膚細(xì)胞

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更新時間:2016-06-16 12:53:15瀏覽次數(shù):253次

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【細(xì)胞凍存】將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日皮膚細(xì)胞保存到液氮中。
A02293 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISA試劑盒 Rat neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit 96T/48T
A02294 大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 Rat Helicobacter pylori IgG,Hp-IgG ELISA Kit 96T/48T
A02295 大鼠雌激素受體(ER)ELISA試劑盒 Rat Estrogen Receptor,ER ELISA Kit 96T/48T
A02296 大鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒 Rat β-Defensins,β-DF ELISA Kit 96T/48T
A02297 大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒 Rat Dopamine D1 receptor,D1R ELISA Kit 96T/48T
A02298 大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒 Rat adrenergic alpha-1A receptor,ADRA1A ELISA Kit 96T/48T
【細(xì)胞株傳代】貼壁細(xì)胞:對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?
懸浮細(xì)胞:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細(xì)胞?
用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細(xì)胞。活細(xì)胞排斥臺盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
A02277 大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒 Rat orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit 96T/48T
A02278 大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒 Rat Protein Phosphatase,PP ELISA Kit 96T/48T
A02279 大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒 Rat thioredoxin reductase,TrxR ELISA Kit 96T/48T
A02280 大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)ELISA試劑盒 Rat Thioredoxin,Trx ELISA Kit 96T/48T
A02281 大鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 Rat Collagenase Type II ELISA Kit 96T/48T
A02282 大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒 Rat Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,TREM-1 ELISA Kit 96T/48T
A02283 大鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA試劑盒 Rat Collagenase I ELISA Kit 96T/48T
A02284 大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒 Rat phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit 96T/48T
A02285 大鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒 Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 96T/48T
A02286 大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 Rat Cathepsin K,cath-K ELISA Kit 96T/48T
A02287 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit 96T/48T
A02288 大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 Rat bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit 96T/48T
A02289 大鼠*結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒 Rat Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit 96T/48T
A02290 大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 Rat 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit 96T/48T
A02291 大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒 Rat Pentosidine ELISA Kit 96T/48T
A02292 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒 Rat advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 96T/48T
 

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