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EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞

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更新時間:2016-05-05 01:21:50瀏覽次數(shù):151次

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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞保存到液氮中。
A01487 人*Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)ELISA試劑盒 Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit 96T/48T
A01488 人*Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒 Human coagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA Kit 96T/48T
A01489 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒 Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 96T/48T
A01490 人纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒 Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit 96T/48T
【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞?
用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細胞?;罴毎懦馀_盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A01470 人皮膚淋巴細胞相關抗原(CLA)ELISA試劑盒 Human cutaneous lymphocyte-associated antigen,CLA ELISA Kit 96T/48T
A01471 人*血栓調(diào)節(jié)蛋白復合物(T-TM)ELISA試劑盒 Human thrombinthrombomodulin compound,T-TM ELISA Kit 96T/48T
A01472 人溶血補體(Hc)ELISA試劑盒 Human Hemolytic complement,Hc ELISA Kit 96T/48T
A01473 人T細胞受體(TCR)ELISA試劑盒 Human T cell receptor,TCR ELISA Kit 96T/48T
A01474 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒 Human lupus anticoagulant,LAC/LA ELISA Kit 96T/48T
A01475 人可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)ELISA試劑盒 Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit 96T/48T
A01476 人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒 Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit 96T/48T
A01477 人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit 96T/48T
A01478 人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒 Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit 96T/48T
A01479 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 Human plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit 96T/48T
A01480 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒 Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit 96T/48T
A01481 人末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒 Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit 96T/48T
A01482 人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 Human Haptoglobin,Hpt/HP ELISA Kit 96T/48T
A01483 人血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 Human 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 96T/48T
A01484 人過敏毒素/補體片斷4(C4a)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit 96T/48T
A01485 人補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 5a,C5a ELISA Kit 96T/48T
A01486 人補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒 Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 96T/48T
 

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