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更新時(shí)間:2016-06-02 00:26:48瀏覽次數(shù):130次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞>50000個(gè)/瓶裝
【細(xì)胞凍存】將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過(guò)夜。次日轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞保存到液氮中。
A00380 人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒 Human β-glucosidase ELISA Kit 96T/48T
A00381 人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒 Human β-lactamase ELISA Kit 96T/48T
A00382 人β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒 Human α mannosidase,α Manase ELISA Kit 96T/48T
A00383 人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 Human Creatine Kinase,CK ELISA Kit 96T/48T
【細(xì)胞株傳代】貼壁細(xì)胞:對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類(lèi)型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊?MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開(kāi)始,各種目的無(wú)血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后會(huì)降解,但是確切的降解率一直沒(méi)有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個(gè)二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個(gè)L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來(lái)保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類(lèi)激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類(lèi)反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類(lèi)細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為PH值的指示劑:中性時(shí)為紅色,酸性時(shí)為黃色,堿性時(shí)為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類(lèi)激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類(lèi)反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類(lèi)細(xì)胞時(shí),用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞?
用無(wú)血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000個(gè)/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?;罴?xì)胞排斥臺(tái)盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
A00363 人*(cAMP)ELISA試劑盒 Human cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit 96T/48T
A00364 人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒 Human Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 96T/48T
A00365 人*(AP)ELISA試劑盒 Human Aprotinin,AP ELISA Kit 96T/48T
A00366 人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒 Human matrix metalloproteinase 11,MMP11 ELISA Kit 96T/48T
A00367 人磷酯酶C(PLC)ELISA試劑盒 Human Phospholipase C,PLC ELISA Kit 96T/48T
A00368 人*蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒 Human serine protease,PRSS ELISA Kit 96T/48T
A00369 人*(UK)ELISA試劑盒 Human urokinase,UK ELISA Kit 96T/48T
A00370 人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒 Human Elastase ELISA Kit 96T/48T
A00371 人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒 Human leukocyte exastase,HLE ELISA Kit 96T/48T
A00372 人α*(AMS/AMY)ELISA試劑盒 Human α-Amylase,AMS/AMY ELISA Kit 96T/48T
A00373 人堿性磷酸酶(ALP)ELISA試劑盒 Human alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit 96T/48T
A00374 人膠原酶II(Collagenase II)ELISA試劑盒 Human Collagenase Type II ELISA Kit 96T/48T
A00375 人乙酰*酯酶(AChE)ELISA試劑盒 Human Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit 96T/48T
A00376 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA試劑盒 Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit 96T/48T
A00377 人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒 Human Hyaluronidase,HAase ELISA Kit 96T/48T
A00378 人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒 Human Acid Phosphatase,ACP ELISA Kit 96T/48T
A00379 人β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒 Human β-glucuronidase,βGD ELISA Kit 96T/48T
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