Anti-cath-B/CB组织蛋白酶B抗体 返回列表页

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Anti-cath-B/CB 组织蛋白酶B抗体规格：0.1ml/0.2ml/1ml（瓶装）
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抗体储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成，常用的有聚丙烯，聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。如储存的抗体中蛋白浓度很低（10-100Mg/L），就应另加隔离蛋白以减少容器对抗体蛋白的吸附，隔离蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。
绝大多数已稀释的抗体应存在4℃-8℃条件下，以免冻融对抗体蛋白产生有害效应。抗体原液和已分离的免疫球蛋白组分应保存于-20℃条件下，并避免反复冻融。冷冻的抗体溶液应置于室温中缓慢地解冻，应避免用高温快速解冻。
被细菌污染的抗体常会出现假阳性结果，应将污染的抗体溶液及其他试剂弃之。为防止细菌污染，可于抗体溶液中加入0.01%叠氮钠。抗体经真空冷冻干燥后置-20℃以下可保存3-5年。
保存稀释后的单抗应加入0.1%叠氮钠浓度。大多数稀释抗体可进行冷冻保存，少数抗体可能会丢失抗原活性。大多数单抗，只要蛋白浓度适当，可在4℃下保存数月。 免疫测定的敏感性、特异性、测定所需时间及稳定性往往都与抗体的亲和常数、特异性以及稳定性等有着直接，因此，对抗体通常也就是从这几个方面着手。
（一）亲和力（affinity）
通常抗体的亲和力是指抗体的单个Fab片段对相应抗原的单个决定基的特异结合能力，抗体的亲和力越高，则其对相应抗原的结合力越强，反之亦然。而多价抗原和抗体之间的结合能力则称为亲和力（avidity），此术语体现了抗原和抗体的价在其结合反应中所起的作用。因此，在亲和力的测定和计算中应考虑抗原和抗体价的作用。决定抗体亲和力除了抗体结合位点与抗原决定簇的空间构型的适合度外，抗体抗原分子间的分子键、库仑引力、范德华引力等也有一定的作用，因此抗体抗原的亲和力与反应条件如pH也有较大的关系。
抗体的亲和力测定方法较多，如ELISA和固相放射免疫测定（SPRIA）方法等。ELISA由于简便快速，具有很好的实用性。
方法：ELISA法测定抗体亲和常数。使用ELISA方法测定抗体的亲和力，首先要用抗原包被96孔聚丙烯微孔板，然后，在抗原浓度保持不变，在液相状态下加入系列不同浓度的抗体反应，再将此反应混合物加入至抗原包被的孑L中，使用约使10％游离抗体被固相抗原吸附的反应条件反应，使得在液相状态下抗原抗体所达成的平衡不至受到破坏，然后从抗原存在和不存在时所测得的吸光度的差异计算游离抗体的比例，这可从吸光度对抗体浓度的校准曲线的线性部分得到，ELISA测定中，当测定显色吸光度与抗体浓度呈线性相关时，假定总的抗体浓度已知，则在反应平衡时游离抗体浓度可使用下式测定：
nd/Bn=ODd/ODB
其中ODd为一给定的抗原浓度存在时所测得的光密度，ODB为抗原不存在时所测得的光密度，于是结合的抗体部分。可定义如下：
α= （ODB -ODd）/ ODB
但这只是在将反应混合物加入至抗原包被孔中时液相中抗原抗体反应平衡没有出现变动对才成立，如果在抗原包被的孔中只有约10％的游离抗体被子固相抗原捕获，就不会破坏这种平衡。为验证这一点，可以将不同已知浓度的抗体加入至包被抗原孔中温育适当的时间后，再将各孔中的反应物移至另一块相同包被的板孔中温育相同的时间，则转移前后加入不同抗体浓度孔中的OD值的差异不应超过10％
结合反应的数据可以下式表示：
Ny/sc=K（Bn-ny）
使用结合的抗体部分α，ny和sc的量可表示为：
ny=αBn
sc=As-Bn
α/sc=K（1-α）
即可构建。α/sc对α的Scatchard图，图上的斜率即为K值。
如果总的抗体结合位点浓度（Bn）未知，则可通过质量作用定律的Klotz公式得到K值。
（二）特异性（specificity）
抗体的特异性关系到免疫测定的特异性，因此特异性是抗体鉴定的一项极为重要的指标。特异性的测定有两种方法，*种方法是证明特定的抗体对抗原没有交叉反应性，也就是说，除了用来免疫制备抗体的抗原外．，抗体对其他相近抗原没有可测定的反应性。第二种方法是证明在抗体对原始特定抗原的结合反应中，其他相近抗原分子对这种结合反应无干扰作用。
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