總T淋巴細胞 , OKT3細胞5×10^5以上/1ml
對于大多數(shù)細胞研究工作者來說，總T淋巴細胞 , OKT3細胞污染那可是個糟糕的事情，也是比較容易出現(xiàn)的情況，我們?nèi)绾畏婪?，如何避免，是我們要學習和掌握的。
1%亞碲酸鉀溶液 5ml*10 適量添加于HB21
營養(yǎng)肉湯（不含糖） 250 一般細菌培養(yǎng),轉(zhuǎn)種,復壯,增菌等
亮綠乳糖培養(yǎng)基 250 用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢驗（GB標準）
總T淋巴細胞 , OKT3細胞腸道菌增菌肉湯 250 用于腸道菌的增菌培養(yǎng)（GB標準）
TTC營養(yǎng)瓊脂 250 用于細菌總數(shù)測定
LB肉湯 250 用于細菌培養(yǎng)
LB營養(yǎng)瓊脂 250 用于細菌培養(yǎng)
苯*脫氨酶培養(yǎng)基 100 用于苯*脫氨酶試驗
哥倫比亞血瓊脂基礎 250g 營養(yǎng)非常豐富，用各種細菌的基礎培養(yǎng)基（AFNOR EP IDF標準）
下面我們對細胞培養(yǎng)中常見的污染情況，做個總結(jié)：
1）原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，zui終形成惡性循環(huán)。
2）霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒*高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。預防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或*或*或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，*或*或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞。，將環(huán)境*消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
3）細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！ 可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理
4）黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率。
5）真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。
6）支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中（不加細胞），37度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。 也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗（*和氨芐*）。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。1、孵箱應定期用三氧機消毒或者 紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應是三蒸水2、超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素3、超凈臺的風機不能過大，風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染4、無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
布氏桿菌抗原檢測試紙卡 20T/盒 血清 抗血清檢測診斷
蔬菜農(nóng)藥速測卡 "20片/盒
" 蔬菜農(nóng)藥殘留檢測
茶葉農(nóng)藥速測卡 "100片/盒
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蔬菜農(nóng)藥檢測卡 "300片/條
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高靈敏度農(nóng)藥速測卡 "100片/盒
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平板計數(shù)瓊脂 250 標準平板計數(shù)瓊脂,含糖,用于細菌總數(shù)的測定
4-甲基傘形酮-D-葡萄糖醛酸苷（MUG） 0.1 添加于100ml HB02中用于大腸桿菌及0157檢定
煌綠乳糖膽鹽肉湯 250 用于大腸菌群,大腸桿菌的測定
EC 肉湯 250 用于糞大腸菌群,大腸桿菌的測定
新生霉素A 2mg/支*5 添加于100ml HB05中用于0157選擇性增菌（SN標準）
伊紅美藍瓊脂（EMB） 250 弱選擇性培養(yǎng)基,用于分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌
營養(yǎng)肉湯 （NB） 250 一般細菌培養(yǎng),轉(zhuǎn)種,復壯,增菌等
營養(yǎng)瓊脂 （NA） 250 細菌計數(shù)（GB標準）,不含糖,可作血瓊脂基礎,傳代用
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基 250 用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定（GB標準）
乳糖復發(fā)酵培養(yǎng)基 250 用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定（GB標準）
去氧膽酸鹽瓊脂 250 用于大腸桿菌固體平板測定,腸道菌選擇性分離
MR-VP培養(yǎng)基 250 用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗（SN標準）
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂 （VRBA） 250 用于大腸菌群的固體平板檢測（SN標準）
西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 250 用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗（GB標準）
腸道菌計數(shù)瓊脂 （VRBDA） 250 用于腸道菌計數(shù)和腸桿菌科鑒別
菌種保存培養(yǎng)基 250 用于常用細菌斜面?zhèn)鞔笆覝乇４?
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 250 用于飲用水,水源水中總大腸菌群的測定
Cary-Blair 氏* 250 用于運送腸道致病菌標本
山梨酸麥康凱瓊脂基礎 250 用于大腸桿菌0157的分離培養(yǎng)（SN標準）
* A 1.25μg/支 添加于100ml HB21中