兔肾细胞系,RK-13细胞 返回列表页

兔肾细胞系 , RK-13细胞5×10^5以上/1ml
对于大多数细胞研究工作者来说，兔肾细胞系 , RK-13细胞污染那可是个糟糕的事情，也是比较容易出现的情况，我们如何防范，如何避免，是我们要学习和掌握的。
Ⅲ型前胶原氨基端原肽（PⅢNP）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Procollagen III N-Terminal Propeptide （PIIINP） Rattus norvegicus （Rat）
兔肾细胞系 , RK-13细胞Toll样受体9（TLR9）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Toll Like Receptor 9 （TLR9） Homo sapiens （Human）
解整合素金属蛋白酶10（ADAM10）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 10 （ADAM10） Rattus norvegicus （Rat）
脂蛋白关联磷脂酶A2（LpPLA2）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Phospholipase A2, Lipoprotein Associated （LpPLA2） Homo sapiens （Human）
烟碱型*受体α1（CHRNα1）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 1 （CHRNa1） Homo sapiens （Human）
下面我们对细胞培养中常见的污染情况，做个总结：
1）原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，zui终形成恶性循环。
2）霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒*高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或*或*或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，*或*或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境*消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。
3）细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！ 可在培养液中加相应的抗生素处理
4）黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。
5）真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。
6）支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。
污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中（不加细胞），37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。 也可以在培养基中事先加入双抗（*和氨苄*）。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。1、孵箱应定期用三氧机消毒或者 紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水2、超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素3、超净台的风机不能过大，风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染4、无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的氨水喷洒中和，约几小时即可进入操作。
极低密度脂蛋白受体（VLDLR）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Very Low Density Lipoprotein Receptor （VLDLR） Rattus norvegicus （Rat）
分泌性白细胞蛋白酶抑制因子（SLPI）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Secretory Leukocyte Peptidase Inhibitor （SLPI） Mus musculus （Mouse）
四旋蛋白30（TSPAN30）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Tetraspanin 30 （TSPAN30） Homo sapiens （Human）
核因子κB（NFκB）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Nuclear Factor Kappa B （NFkB） Rattus norvegicus （Rat）
解整合素金属蛋白酶9（ADAM9）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 9 （ADAM9） Rattus norvegicus （Rat）
铁调素（Hepc）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Hepcidin （Hepc） Homo sapiens （Human）
Toll样受体3（TLR3）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Toll Like Receptor 3 （TLR3） Mus musculus （Mouse）
白介素35（IL35）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Interleukin 35 （IL35） Mus musculus （Mouse）
骨成型蛋白10（BMP10）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 （BMP10） Mus musculus （Mouse）
Ⅻ型胶原（COL12）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Collagen Type XII （COL12） Homo sapiens （Human）
衰老关键蛋白1（FBLN1）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Fibulin 1 （FBLN1） Homo sapiens （Human）
硬骨素（SOST）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Sclerostin （SOST） Mus musculus （Mouse）
肝配蛋白A5（EFNA5）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Ephrin A5 （EFNA5） Homo sapiens （Human）
免疫球蛋白A2（IgA2）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Immunoglobulin A2 （IgA2） Homo sapiens （Human）
沉默调节蛋白1（SIRT1）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Sirtuin 1 （SIRT1） Rattus norvegicus （Rat）
衰老关键蛋白3（FBLN3）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Fibulin 3 （FBLN3） Homo sapiens （Human）
*受体1（FOLR1）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Folate Receptor 1, Adult （FOLR1） Homo sapiens （Human）
Klotho蛋白（KL）检测试剂盒（化学发光免疫分析法） CLIA Kit for Klotho （KL） Homo sapiens （Human）