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更新時間:2016-02-18 10:07:05瀏覽次數(shù):268次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒Mouse granzymes A,Gzms-A ELISA試劑盒96T/48T
小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒Mouse lymphotactin,Lptn/LTN ELISA試劑盒 96T/48T
乳腺腫瘤,C127細胞 小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒Mouse terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA試劑盒96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor,VEGFR-3/Flt-4 ELISA試劑盒 96T/48T
ATCC細胞株的品質(zhì),乳腺腫瘤,C127細胞國內(nèi)細胞的價格。對于初做細胞培養(yǎng)研究的工作者來說,會經(jīng)常出現(xiàn)細胞培養(yǎng)問題,公司在細胞培養(yǎng)問題方面做了些總結(jié),希望對你們能有所幫助。
【乳腺腫瘤,C127細胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液,松開瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,同時pH 發(fā)生變化】細菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)細胞不貼壁】*消化過度;支原體污染;培養(yǎng)液中無貼壁因子,縮短*消化時間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
【懸浮細胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過度消化使得細胞裂解釋放DNA,用無鈣鎂*洗滌細胞,輕輕吹吸細胞獲得單細胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細胞。
【原代細胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復沖洗組織。
【培養(yǎng)細胞死亡】培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2。培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大。細胞凍存或復蘇過程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積;檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細胞種;檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數(shù)哺乳動物細胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細胞生長減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如*或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染。試劑保存不當。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。
1)增加起始培養(yǎng)細胞濃度。
2)讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補加*或生長因子。
5)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物。或用抗生素除菌。
6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內(nèi)用完。
8)接種細胞起始濃度太低,細胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細胞起始濃度。
10)換用新的保種細胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒Mouse Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA試劑盒96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA試劑盒 96T/48T
小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒Mouse alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA試劑盒96T/48T
小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒Mouse myeloperoxidase,MPO ELISA試劑盒96T/48T
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒Mouse granzymes B,Gzms-B ELISA試劑盒96T/48T
小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1,VEGFR-1/Flt1 ELISA試劑盒 96T/48T
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