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人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤,U251細(xì)胞

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更新時間:2016-12-19 21:51:54瀏覽次數(shù):282次

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人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤,U251細(xì)胞,公司貼壁細(xì)胞、 懸浮細(xì)胞、復(fù)蘇細(xì)胞、凍存細(xì)胞提供,全國統(tǒng)一價格品牌銷售。

人蛋白*磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒Human protein tyrosine phosphatase,PTP/PTPase ELISA試劑盒96T/48T
人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒Human TNF α converting enzyme,TACE ELISA試劑盒 96T/48T
人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤,U251細(xì)胞 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)ELISA試劑盒Human Polymorphonuclear Elastase,PMN Elastase ELISA試劑盒96T/48T
人*型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)ELISA試劑盒Human urokinase-type plasminogen activator,uPA/PLAU ELISA試劑盒96T/48T 
ATCC細(xì)胞株的品質(zhì),人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤,U251細(xì)胞國內(nèi)細(xì)胞的價格。對于初做細(xì)胞培養(yǎng)研究的工作者來說,會經(jīng)常出現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)問題,公司在細(xì)胞培養(yǎng)問題方面做了些總結(jié),希望對你們能有所幫助。
人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤,U251細(xì)胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細(xì)菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液,松開瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復(fù)沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,同時pH 發(fā)生變化】細(xì)菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。

【培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁】*消化過度;支原體污染;培養(yǎng)液中無貼壁因子,縮短*消化時間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。

【懸浮細(xì)胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解釋放DNA,用無鈣鎂*洗滌細(xì)胞,輕輕吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細(xì)胞。
【原代細(xì)胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進(jìn)入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復(fù)沖洗組織。
【培養(yǎng)細(xì)胞死亡】培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2。培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大。細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積;檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細(xì)胞種;檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如*或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。試劑保存不當(dāng)。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實驗。
1)增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度。
2)讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補(bǔ)加*或生長因子。
5)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物?;蛴每股爻?。
6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內(nèi)用完。
8)接種細(xì)胞起始濃度太低,細(xì)胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細(xì)胞起始濃度。
10)換用新的保種細(xì)胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
人酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)ELISA試劑盒Human acid sphingomyelinase, ASM ELISA試劑盒96T/48T
人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA試劑盒Human arachidonate 5-lipoxygenase,ALOX-5 ELISA試劑盒96T/48T
人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒Human 5-lipoxygenase,5-LO/LOX ELISA試劑盒96T/48T
人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA試劑盒 Human adenylyl cyclase 1,AC-1 ELISA試劑盒96T/48T
人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA試劑盒Human Soluble Adenylate Cyclase,sAC ELISA試劑盒96T/48T
人*脫羧酶(ODC)ELISA試劑盒Human Ornithine decarboxylase,ODC ELISA試劑盒96T/48T
人蛋白*激酶(PTK/CD115)ELISA試劑盒Human protein tyrosine kinase,PTK ELISA試劑盒96T/48T
 

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