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人血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)ELISA試劑盒human phosphofructokinase-plaet,PFKP ELISA試劑盒96T/48T
人尿苷二磷酸葡萄糖神經酰胺葡萄糖基轉移酶(UGCG)ELISA試劑盒human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase ELISA試劑盒96T/48T
人B淋巴細胞瘤,RAMOS(RA.1)細胞 人凋亡相關半*肽酶4(Casp4)ELISA試劑盒human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA試劑盒96T/48T
人吡哆醛/吡哆醇*6激酶(PDXK)ELISA試劑盒human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA試劑盒96T/48T
ATCC細胞株的品質,人B淋巴細胞瘤,RAMOS(RA.1)細胞國內細胞的價格。對于初做細胞培養(yǎng)研究的工作者來說,會經常出現細胞培養(yǎng)問題,公司在細胞培養(yǎng)問題方面做了些總結,希望對你們能有所幫助。
【人B淋巴細胞瘤,RAMOS(RA.1)細胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液,松開瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現沉淀,同時pH 發(fā)生變化】細菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)細胞不貼壁】*消化過度;支原體污染;培養(yǎng)液中無貼壁因子,縮短*消化時間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
【懸浮細胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過度消化使得細胞裂解釋放DNA,用無鈣鎂*洗滌細胞,輕輕吹吸細胞獲得單細胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。如發(fā)現支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細胞。
【原代細胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復沖洗組織。
【培養(yǎng)細胞死亡】培養(yǎng)箱內無CO2。培養(yǎng)箱內溫度波動太大。細胞凍存或復蘇過程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產物堆積;檢測培養(yǎng)箱內CO2檢查培養(yǎng)箱內溫度;取新的保存細胞種;檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數哺乳動物細胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細胞生長減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如*或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染。試劑保存不當。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。
1)增加起始培養(yǎng)細胞濃度。
2)讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補加*或生長因子。
5)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現污染,丟棄培養(yǎng)物?;蛴每股爻?。
6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內用完。
8)接種細胞起始濃度太低,細胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細胞起始濃度。
10)換用新的保種細胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
人磷脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA試劑盒human phospholipid scramblase 1,PLSCR1 ELISA試劑盒96T/48T
人3-羥基-3-甲基戊二酰*合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1,HMGCS1 ELISA試劑盒96T/48T
人嗜酸性白血球相關之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)ELISA試劑盒human eosinophil-associated ribonuclease A family member 12,EAR12 ELISA試劑盒96T/48T
人嗜酸性白血球相關之RNA水解酵素家族成員3(EAR3)ELISA試劑盒human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3,EAR3 ELISA試劑盒96T/48T
人嗜酸性白血球相關之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)ELISA試劑盒human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2 ELISA試劑盒96T/48T
人二氫嘧啶酶樣3(DPYSL3)ELISA試劑盒human dihydropyrimidinase-like 3,DPYSL3 ELISA試劑盒96T/48T
人色氨酰tRNA合成酶(WARS)ELISA試劑盒human tryptophanyl-tRNA synthetase,WARS ELISA試劑盒96T/48T
人己糖激酶3(HK3)ELISA試劑盒human hexokinase 3,HK3 ELISA試劑盒96T/48T
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