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人胚膀胱組織來源細(xì)胞,CCC-HB-2細(xì)胞

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人NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA試劑盒Human anti-Nogo-A antibody,NOGO-A Ab ELISA試劑盒 96T/48T
人抗組織轉(zhuǎn)*酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒Human Anti-tissue tranGSlutaminase IgA,tTG-IgA ELISA試劑盒96T/48T
人胚膀胱組織來源細(xì)胞,CCC-HB-2細(xì)胞 人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒Human anti-Survivin antibody,Surv ELISA試劑盒 96T/48T
人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA試劑盒Human anti-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody,GM-CSF Ab ELISA試劑盒 96T/48T 
ATCC細(xì)胞株的品質(zhì),人胚膀胱組織來源細(xì)胞,CCC-HB-2細(xì)胞國(guó)內(nèi)細(xì)胞的價(jià)格。對(duì)于初做細(xì)胞培養(yǎng)研究的工作者來說,會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)問題,公司在細(xì)胞培養(yǎng)問題方面做了些總結(jié),希望對(duì)你們能有所幫助。
人胚膀胱組織來源細(xì)胞,CCC-HB-2細(xì)胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對(duì)。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細(xì)菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液,松開瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復(fù)沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動(dòng)使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,同時(shí)pH 發(fā)生變化】細(xì)菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。

【培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁】*消化過度;支原體污染;培養(yǎng)液中無貼壁因子,縮短*消化時(shí)間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。

【懸浮細(xì)胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解釋放DNA,用無鈣鎂*洗滌細(xì)胞,輕輕吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細(xì)胞。
【原代細(xì)胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進(jìn)入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復(fù)沖洗組織。
【培養(yǎng)細(xì)胞死亡】培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2。培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大。細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積;檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細(xì)胞種;檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如*或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。試劑保存不當(dāng)。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)。
1)增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度。
2)讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補(bǔ)加*或生長(zhǎng)因子。
5)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物?;蛴每股爻?br />6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內(nèi)用完。
8)接種細(xì)胞起始濃度太低,細(xì)胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細(xì)胞起始濃度。
10)換用新的保種細(xì)胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒 Human gastrin-reliasing peptide,GRP ELISA試劑盒96T/48T
人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒Human pro-gastrin-releasing peptide, ProGRP ELISA試劑盒96T/48T
人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA試劑盒Human Secretin ELISA試劑盒96T/48T
人*原激活肽(TAP)ELISA Human trypsinogen activation peptide,TAP ELISA試劑盒96T/48T
人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒Human α1-Acid glycoprotein,α1-AGP ELISA試劑盒96T/48T
人胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒Human Amylin ELISA試劑盒96T/48T
人血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒Human Motilin,MTL ELISA試劑盒96T/48T
 

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