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更新時間:2016-03-01 06:12:54瀏覽次數(shù):243次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)大鼠*酯轉移蛋白(CETP)Rat cholesterolestertransferprotein ELISA KiISA
大鼠血管緊張素原(aGT)Rat angiotensinogen ELISA KiISA
小鼠胚成纖維包裝細胞,ψ2細胞 大鼠熱休克蛋白60(Hsp60) Rat heat shock protein 60 ELISA KiISA
大鼠丙二醛(MDA)Rat malondialchehyche ELISA KiISA
大鼠超氧化物歧化酶(SOD)Rat SOD ELISA KiISA
大鼠腫瘤排斥性抗原gp96(gp96) Rat Glycoprotein96 ELISA KiISA
ATCC細胞株的品質(zhì),小鼠胚成纖維包裝細胞,ψ2細胞國內(nèi)細胞的價格。對于初做細胞培養(yǎng)研究的工作者來說,會經(jīng)常出現(xiàn)細胞培養(yǎng)問題,公司在細胞培養(yǎng)問題方面做了些總結,希望對你們能有所幫助。
【小鼠胚成纖維包裝細胞,ψ2細胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液,松開瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,同時pH 發(fā)生變化】細菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)細胞不貼壁】*消化過度;支原體污染;培養(yǎng)液中無貼壁因子,縮短*消化時間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
【懸浮細胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過度消化使得細胞裂解釋放DNA,用無鈣鎂*洗滌細胞,輕輕吹吸細胞獲得單細胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細胞。
【原代細胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復沖洗組織。
【培養(yǎng)細胞死亡】培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2。培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大。細胞凍存或復蘇過程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積;檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細胞種;檢測培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數(shù)哺乳動物細胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細胞生長減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如*或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染。試劑保存不當。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗。
1)增加起始培養(yǎng)細胞濃度。
2)讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補加*或生長因子。
5)用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物?;蛴每股爻?br />6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內(nèi)用完。
8)接種細胞起始濃度太低,細胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細胞起始濃度。
10)換用新的保種細胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTnI)ELISA試劑盒Rat Troponin I ELISA KiISA
大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)Rat Serum amyloid A ELISA KiISA
大鼠結合珠蛋白(Hpt)Rat Haptoglobin ELISA KIISA
大鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)Rat α1-Acid glycoprotein ELISA KiISA
大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)Rat Endothelial nitric oxide synthase 3 ELISA KiISA
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