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更新時(shí)間:2016-06-07 01:33:46瀏覽次數(shù):193次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)雜交瘤細(xì)胞(B6YH4)支原體陽(yáng)性,B6YH4細(xì)胞
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系,CHO-K1細(xì)胞
敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞系,BHK-21細(xì)胞
癌胚抗原(CEA)CEAELISA
人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒Human malondialchehyche ELISA KiISA
KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株,LⅡ細(xì)胞 人葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽(GIP)Huamn Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide ELISA KiISA
人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK) Human Pyruvate Kinase M2 ELISA KiISA
纖維連結(jié)蛋白FNELISA
透明質(zhì)酸HAELISA
人層粘連蛋白LamininELISA
ATCC細(xì)胞株的品質(zhì),KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株,LⅡ細(xì)胞國(guó)內(nèi)細(xì)胞的價(jià)格。對(duì)于初做細(xì)胞培養(yǎng)研究的工作者來(lái)說(shuō),會(huì)經(jīng)常出現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題,公司在細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題方面做了些總結(jié),希望對(duì)你們能有所幫助。
【KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株,LⅡ細(xì)胞培養(yǎng)液pH值變化太快】CO2張力不對(duì)。培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊。NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足。培養(yǎng)液中鹽濃度不正確。細(xì)菌、酵母或真菌污染。
按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%。(2)改用不依賴(lài)CO2培養(yǎng)液,松開(kāi)瓶蓋1/4圈,加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度,在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hank’s鹽配制的培養(yǎng)液,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,但pH值不變】用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養(yǎng)基成分沉淀下來(lái)。冰凍保存培養(yǎng)液,用去離子水反復(fù)沖洗玻璃器皿,然后除菌,將培養(yǎng)液加熱到37℃,搖動(dòng)使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀,同時(shí)pH 發(fā)生變化】細(xì)菌或真菌污染,丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。
【培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁】*消化過(guò)度;支原體污染;培養(yǎng)液中無(wú)貼壁因子,縮短*消化時(shí)間或降低*濃度,分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
【懸浮細(xì)胞成簇】培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子。支原體污染。蛋白酶過(guò)度消化使得細(xì)胞裂解釋放DNA,用無(wú)鈣鎂*洗滌細(xì)胞,輕輕吹吸細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液,分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物,用DNase I處理細(xì)胞。
【原代細(xì)胞培養(yǎng)物污染】原代培養(yǎng)組織在進(jìn)入培養(yǎng)前已污染,培養(yǎng)前用含高濃度抗生素的*反復(fù)沖洗組織。
【培養(yǎng)細(xì)胞死亡】培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2。培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大。細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷。培養(yǎng)液滲透壓不正確。培養(yǎng)液種有毒代謝產(chǎn)物堆積;檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;取新的保存細(xì)胞種;檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓。注意:大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞能耐受滲透壓為260–350mOsm/kg。加入額外試劑如HEPES或藥物都有可能影響培養(yǎng)液滲透壓,換入新鮮培養(yǎng)液。
【培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢】由于更換不同培養(yǎng)液或血清。培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如*或生長(zhǎng)因子耗盡或缺乏或已被破壞。培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染。試劑保存不當(dāng)。
比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)。
1)增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度。
2)讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液。
3)換入新鮮配制培養(yǎng)液。
4)補(bǔ)加*或生長(zhǎng)因子。
5)用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物?;蛴每股爻?br />6)血清需保存在-5℃ 到-20℃。培養(yǎng)液需在2–8℃避光保存。含血清*培養(yǎng)液在2–8℃7)保存,并在2周內(nèi)用完。
8)接種細(xì)胞起始濃度太低,細(xì)胞已老化,支原體污染。
9)增加接種細(xì)胞起始濃度。
10)換用新的保種細(xì)胞。
11)分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
人熱休克蛋白20(HSP20)ELISA試劑盒Human Heat Shock Protein 20 ELISA KiISA
人細(xì)胞周期素D3(Cyclin D3)Human Cyclin D3 ELISA KiISA
人細(xì)胞周期素D2(Cyclin D2)Human Cyclin D2 ELISA KiISA
人細(xì)胞周期素D1(Cyclin D1)Human Cyclin D1 ELISA KiISA
人凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒Human Gelsolin ELISA KiISA
游離前列腺特異性抗原(FREE PSA)FREE PSAELISA
人前列腺特異性抗原(PSA)Human PSA ELISA KiISA
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