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更新時間:2015-12-30 14:07:45瀏覽次數(shù):228次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞
細(xì)胞來源于美國ScienCell實驗室、美國ATCC細(xì)胞庫,所有細(xì)胞均為原代細(xì)胞,非細(xì)胞系。細(xì)胞經(jīng)過嚴(yán)格的控制(從組織來源、實驗室條件等方面),純度可達(dá)98%。不同的細(xì)胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細(xì)胞種類是從胚胎提取,于原代(或二代)凍存在液氮中。SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞采用干冰運輸,客戶收到細(xì)胞后,從干冰中取出放入液氮中保存,待實驗安排好后,解凍后即可以進行復(fù)蘇培養(yǎng)。美國ATCC細(xì)胞庫、ScienCell實驗室的細(xì)胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過嚴(yán)格檢驗,分離、配制而成,產(chǎn)品質(zhì)量過硬。
Apelin 12蛋白(AP12)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Apelin 12 (AP12)Mus musculus (Mouse)
降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)Homo sapiens (Human)
降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)Mus musculus (Mouse)
細(xì)胞培養(yǎng)常見問題
1.原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?
細(xì)胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,*次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞zui大的生長空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的*性。
細(xì)胞系是不斷生長,分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。實際上,連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
2.倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?
倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生*。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進一步生長。
3.接收到的凍存細(xì)胞該如何處理?
收到包裝箱后,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細(xì)胞儲存在-80℃,這樣會對細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
4.有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細(xì)胞培養(yǎng)?
*有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗的話對其它細(xì)胞類型也是很有利的。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實驗室,我們會為你提供幫助。請的細(xì)胞培養(yǎng)專家。
5.凍存的細(xì)胞該如何開始培養(yǎng)?
⑴將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。
⑵用10秒鐘時間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊。
⑶將小管放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。
⑷將小管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。
⑸用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精。
⑹打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內(nèi)容物。
⑺平衡管內(nèi)物,用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶(多數(shù)細(xì)胞用T-75的培養(yǎng)瓶)。多數(shù)細(xì)胞類型*接種密度為每平方厘米5000細(xì)胞。
⑻蓋好蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
⑼將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
⑽植入培養(yǎng)后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。
6.當(dāng)我*次植入正常人類細(xì)胞時需要旋轉(zhuǎn)細(xì)胞去除二甲基亞楓嗎?
*次植入正常凍存細(xì)胞時,我們不*旋轉(zhuǎn)去除二甲基亞楓。離心過程比殘留二甲基亞楓對細(xì)胞的傷害更大,尤其是不正當(dāng)?shù)母咚傩D(zhuǎn)。我們的經(jīng)驗是如果二甲基亞楓的濃度很低,細(xì)胞不會受毒害。如果你將1ml細(xì)胞植入已加入15ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中,二甲基亞楓的濃度將小于0.67%,沒有發(fā)現(xiàn)負(fù)面影響。實際上,如果細(xì)胞的接種密度為每平方厘米5000-10000,二甲基亞楓的濃度很低。
7.多久更換一次培養(yǎng)基?
一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入凍存的細(xì)胞后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。
8.我能擴培和再冰凍的正常人類細(xì)胞嗎?
這取決于細(xì)胞類型。一些細(xì)胞類型像神經(jīng)細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長緩慢的上皮細(xì)胞不*擴培和再冰凍。其它的細(xì)胞類型像成纖維細(xì)胞、星形細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等等可以擴培和再冰凍。然而,需要注意的是再冰凍的過程可能導(dǎo)致細(xì)胞生長性能的改變。如果你想要再冰凍細(xì)胞,請親自咨詢我們的并使用SF-CFM,和特定的無血清培養(yǎng)基,以獲得的效果。
9.我能長時間凍存的培養(yǎng)基嗎?
不*凍存培養(yǎng)基,冰凍高營養(yǎng)的培養(yǎng)基將導(dǎo)致培養(yǎng)基成分不可逆降解。
10.培養(yǎng)瓶中應(yīng)該加入多少體積的培養(yǎng)基?
*用量:T-25培養(yǎng)瓶5ml,T-75培養(yǎng)瓶15ml,T-150培養(yǎng)瓶30ml。
11.使用你們的專業(yè)培養(yǎng)基,還需要另外的補充物嗎?
公司的培養(yǎng)基是為每一類細(xì)胞特定研制的。加入相關(guān)的培養(yǎng)成分(生長因子,抗生素和胎牛血清)到基本培養(yǎng)液中,你就得到了*培養(yǎng)基。其它的不再需要。
12.*培養(yǎng)基的保質(zhì)期是多久?
加入所有的補充物后,培養(yǎng)液就成了*培養(yǎng)基。如果*培養(yǎng)基儲存在4℃條件下,并且每次使用時置于常溫的時間盡量少,*培養(yǎng)基的保質(zhì)期為6周。
13.可以使用自己的或其它公司的培養(yǎng)基培養(yǎng)的正常人類細(xì)胞嗎?
公司的正常人類細(xì)胞使用我們的*培養(yǎng)基培養(yǎng)并通過測試,細(xì)胞已適應(yīng)此*培養(yǎng)基。使用其它的培養(yǎng)基,由于需要適應(yīng)過程可能會導(dǎo)致細(xì)胞不良生長。我們*使用我們特定的培養(yǎng)基培養(yǎng)正常人類細(xì)胞。
14.正常人類細(xì)胞能傳多少代?
不使用代數(shù)描述細(xì)胞的生長潛能,因為每一位客戶用不同的分流比。保證在培養(yǎng)過程中使用我們的培養(yǎng)基和試劑,正常人類細(xì)胞達(dá)到15倍增倍增(除了在說明書中已指明的)。
15.正常人類細(xì)胞*的分流比是多少?
公司不*對正常人類細(xì)胞使用分流比,因為在用*處理后細(xì)胞的產(chǎn)量會有所變化。我們*在*作用后對細(xì)胞計數(shù),接種密度為5000-10000細(xì)胞每平方厘米(在細(xì)胞說明書中有*接種密度)。
16. 可以使正常人類細(xì)胞處于實驗性饑餓嗎?
可以將正常人類細(xì)胞處于實驗性饑餓。細(xì)胞在沒有添加物的基本培養(yǎng)基中可以維持一段時間,但細(xì)胞必須處于良好的環(huán)境中。過了這段時期,實驗應(yīng)終止,因為時間過長將導(dǎo)致細(xì)胞死亡。在實驗前測試一下細(xì)胞在饑餓條件下能存活多長時間,這取決于多種因素。
17. 可以用質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染正常人類細(xì)胞嗎?
當(dāng)然,我們已成功轉(zhuǎn)染了多種細(xì)胞,比如皮膚成纖維細(xì)胞,肺成纖維細(xì)胞,皮膚微血管內(nèi)皮細(xì)胞等等。
促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH)Mus musculus (Mouse)
促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Adrenocorticotropic Hormone (ACTH)Rattus norvegicus (Rat)
催乳素(PRL)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Prolactin (PRL)Homo sapiens (Human)
抵抗素(RETN)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Resistin (RETN)Mus musculus (Mouse)
多巴胺(DA)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Dopamine (DA)General
核因子κB受體激活因子配基(RANκL)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B Ligand (RANkL)Homo sapiens (Human)
Apelin 12蛋白(AP12)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)CLIA Kit for Apelin 12 (AP12)Homo sapiens (Human)
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