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小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒

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更新時間:2018-04-19 16:49:14瀏覽次數(shù):370次

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【產(chǎn)品名稱】: 小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒
【英文名稱】: Mouse lymphocyte factor ELISA KIT
【方 法】: 酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品貨號】: BYS12745B
【規(guī)        格】: 96T/48T
【標(biāo)        本】: 血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、尿液、分泌物等
【保存條件】: 2-8℃
【有 效 期】: 6個月
【運(yùn)輸條件】: 低溫運(yùn)輸,用干冰或者冰袋低溫運(yùn)輸。


小鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測O•D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O•D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
  方法二 用于檢測未知抗體的間接法:   
  用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

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