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使用目的:
本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細胞介素10(IL-10)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛白細胞介素10(IL-10)水平。用純化的牛白細胞介素10(IL-10)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素10(IL-10),再與HRP標(biāo)記的白細胞介素10(IL-10)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素10(IL-10)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中牛白細胞介素10(IL-10)濃度。
牛白細胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒免費代測
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
40ng/L | 5號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
20ng/L | 4號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
10 ng/L | 3號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
5 ng/L | 2號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2.5 ng/L | 1號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
牛白細胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒免費代測相關(guān)產(chǎn)品:
Anti-Secretin receptor/FITC 熒光素標(biāo)記分泌素受體抗體IgG
Anti-SEL1L/FITC 熒光素標(biāo)記SEL1L抗體IgG
Anti-Selenoprotein W/FITC 熒光素標(biāo)記硒蛋白W抗體IgG
Anti-Sema3A/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白3A抗體IgG
Anti-Sema3F/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白3F抗體IgG
Anti-Sema4C/FITC 熒光素標(biāo)記臂板蛋白4C抗體IgG
Anti-sFRP/FITC 熒光素標(biāo)記抗子宮內(nèi)膜抗體IgG
Anti-SFRP1/FITC 熒光素標(biāo)記分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體IgG
Anti-SGC/FITC 熒光素標(biāo)記可溶性糖蛋白C抗體IgG
Anti-SGLT1 /FITC 熒光素標(biāo)記鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1抗體IgG
Anti-Shadow/SPRN/FITC 熒光素標(biāo)記新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗體IgG
Anti-Shank1/FITC 熒光素標(biāo)記shank-1抗體IgG
Anti-SHBG /FITC 熒光素標(biāo)記性激素結(jié)合球蛋白抗體IgG
Anti-Shh/FITC 熒光素標(biāo)記Shh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體IgG
Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光素標(biāo)記抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌株)抗體IgG
Anti-SHP-1/FITC 熒光素標(biāo)記造血細胞磷酸酶抗體IgG
Anti-SHP2/PTPN11 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白*磷酸酶2抗體IgG
Anti-Shrimp tropomyosin /FITC 熒光素標(biāo)記南美白對蝦過敏原蛋白(蝦原肌球蛋白)抗體IgG
Anti-SIP1 /FITC 熒光素標(biāo)記運動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體IgG
Anti-SIRT1/FITC 熒光素標(biāo)記沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體IgG
Anti-Skp2/FITC 熒光素標(biāo)記細胞S相激酶相關(guān)蛋白抗體IgG
Anti-SLC4A4/FITC 熒光素標(biāo)記*協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4抗體IgG
Anti-Slc4a7/Nbcn1 /FITC 熒光素標(biāo)記*協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A7抗體IgG
Anti-SLC6A19 /FITC 熒光素標(biāo)記鉀依賴鈉鈣交換蛋白6IgG
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