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使用目的:
本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)含量。
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中雞胰島素(INS)水平。用純化的雞胰島素(INS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的胰島素(INS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中雞胰島素(INS)濃度。
雞胰島素(INS)ELISA試劑盒
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
480pg/ml | 5號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
240pg/ml | 4號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
120pg/ml | 3號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
60pg/ml | 2號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
30pg/ml | 1號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,
避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
雞胰島素(INS)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
Anti-omerase Binding Protein,P23 端粒酶結(jié)合蛋白P23抗體
Anti-TRIM32(tripartite motif protein 32) TRIM32抗體
Anti-TrK A (Tyrosine kinase,TrkA) *激酶A抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)
Anti-TrK A.B.C/TrK(Tyrosine kinase,TrkA.B.C) *激酶A.B.C抗體
Anti-Trk B(Tyrosine kinase,Pyk2) *激酶B抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)
Anti-Trk B(Tyrosine kinase,TrkB) *激酶B抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)
Anti-Trk C(Tyrosine kinase,TrkC) *激酶C抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)
Anti-Trop-2/Tpm2 原肌球蛋白抗體
Anti-TRP2(tyrosinase related protein 2) *酶相關(guān)蛋白2抗體
Anti-Trx(Thioredoxin) 硫氧還蛋白抗體
Anti-TRP1/gp75(tyrosinase related protein 1) *酶相關(guān)蛋白1抗體
Anti-TSARG3(Testis and spermatogenesis related gene 3) 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3抗體
Anti-TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4) 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體
Anti-TSARG6/DNAJB13(Testis and spermatogenesis related gene 6) 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體
Anti-TSARG7/Agpat6/GPAT4(Testis spermatogensis apoptosis-related protein 7) 精子發(fā)生相關(guān)的新基因抗體
Anti-CIDEB (cell death activator CIDE-B) CIDEB抗體
Anti-Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) tsg101抗體
Anti-TSH(Thyroid stimulating hormone) 促甲狀腺素抗體
Anti-TSH(mouse Anti-Thyroid stimulating hormone Monoclonal) 小鼠抗人促甲狀腺素單克隆抗體(又稱垂體甲狀腺雌激素單抗)
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