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人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

時(shí)間:2016/11/23閱讀:237
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人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

操作步驟 1. 從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL;

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本 50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體 100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙 上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。

7. 每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD 值。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算 以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪 制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。

人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟說明
由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分
析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。

1. zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請(qǐng)
務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

2. 不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別,如:檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等,請(qǐng)依據(jù)
試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,電子版說明書僅作參考。

3. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。

4. 本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé),不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使
用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。

5. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致 ELISA 實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。

6. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測(cè)不出的情況。

7. 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)
抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測(cè)出。

人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟,詳細(xì)產(chǎn)品說明書,請(qǐng)?zhí)砑涌头魅?/p>

 

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