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人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA檢測試劑盒技術(shù)支持

時間:2016/10/11閱讀:432
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人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA檢測試劑盒保存條件及有效期

1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月

我司elisa試劑盒提供免費(fèi)代測服務(wù),訂購,免費(fèi)快遞送貨上門,詳情可咨詢我公司客服。

使用目的:

本試劑盒用于測定人EDTA抗凝血漿樣本中血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)表達(dá)。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)表達(dá)。用純化的人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)的存在與否。

 

人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA檢測試劑盒試劑盒組成

130倍濃縮洗滌液20ml×17終止液6ml×1
2酶標(biāo)試劑6ml×18標(biāo)準(zhǔn)品(64ng/L0.5ml×1
3酶標(biāo)包被板12孔×89標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1
4樣品稀釋液6ml×110說明書1
5顯色劑A6ml×111封板膜2
6顯色劑B6ml×1/12密封袋1

計算
  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA檢測試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.  請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

 

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