第四儀器公司對分子發(fā)光分析法的講解
1. 熒光和磷光的產(chǎn)生：具有不飽和基團的基態(tài)分子受光照后，價電子躍遷產(chǎn)生熒光和磷光。
2. 激發(fā)光譜和發(fā)射光譜：
激發(fā)光譜：將激發(fā)光的光源用單色器分光，測定不同波長照射下所發(fā)射的熒光強度（F），以F做縱坐標，激發(fā)光波長λ做橫坐標作圖。激發(fā)光譜反映了激發(fā)光波長與熒光強度之間的關系。
發(fā)射光譜：固定激發(fā)光波長，讓物質(zhì)發(fā)射的熒光通過單色器，測定不同波長的熒光強度，以熒光強度F做縱坐標，熒光波長λ做橫坐標作圖。熒光光譜反映了發(fā)射的熒光波長與熒光強度的關系。
3. 熒光和分子結構的關系
發(fā)射熒光的物質(zhì)應同時具備以下兩個條件：
物質(zhì)分子必須具有能夠吸收紫外或可見光的結構，并且能產(chǎn)生π→π* 或 n→π* 躍遷。
熒光物質(zhì)必須有較大的熒光量子產(chǎn)率。
（1）躍遷類型：π→π*較n→π*躍遷的熒光效率高。
（2）共軛結構：凡是能提高π電子共軛度的結構，都會增大熒光強度，并使熒光光譜長移。
（3）剛性平面：分子的剛性及共平面性越大，熒光量子產(chǎn)率就越大。
（4）取代基效應：在芳香化合物的芳香環(huán)上，給電子基團增強熒光，吸電子基團減弱熒光。
一、熒光分析法的特點
優(yōu)點：靈敏度高（提高激發(fā)光強度，可提高熒光強度），達ng/ml；選擇性強（比較容易排除其它物質(zhì)的干擾），重現(xiàn)性好；取樣少。
缺點：許多物質(zhì)本身不能發(fā)射熒光，因此，應用不夠廣泛。
二、熒光分析法與UV-Vis法的比較
相同點：都需要吸收紫外-可見光，產(chǎn)生電子能級躍遷。
不同點：
熒光法測定的是物質(zhì)經(jīng)紫外-可見光照射后發(fā)射出的熒光的強度 (F);
UV-Vis法測定的是物質(zhì)對紫外-可見光的吸收程度 (A) ;
熒光法定量測定的靈敏度比UV-Vis法高。
三、名詞解釋：
單重態(tài)：當基態(tài)分子的電子都配對時，S = 0，多重性 M=1，這樣的電子能態(tài)稱為單重態(tài)。
單重電子激發(fā)態(tài)：當基態(tài)分子的成對電子吸收光能之后，被激發(fā)到某一激發(fā)態(tài)上。如果它的自旋方向不變，S=0，M=1，這時的激發(fā)態(tài)叫單重電子激發(fā)態(tài)。
三重態(tài)：若通過分子內(nèi)部的一些能量轉移，或能階間的跨越，成對電子中的一個電子自旋方向倒轉，使兩個電子自旋方向相同而不配對，這時S=1，M=3，這種電子激發(fā)態(tài)稱三重電子激發(fā)態(tài)（三重態(tài)）
系間跨越：指的是不同多重度狀態(tài)間的一種*躍遷過程。
振動弛豫：
內(nèi)轉換：指的是相同多重度等能態(tài)間的一種*躍遷過程。
量子產(chǎn)率：也稱熒光效率或量子效率，其值在0~1之間，它表示物質(zhì)發(fā)射熒光的能力。
熒光猝滅：指熒光物質(zhì)分子與溶劑分子或其他溶質(zhì)分子相互作用引起熒光強度降低或熒光強度與濃度不呈線性關系的現(xiàn)象。
重原子效應：
