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非洲豬瘟病毒檢測(cè)試劑 非洲豬瘟檢測(cè)試劑廠家

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產(chǎn)品型號(hào)48T

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地深圳市

聯(lián)系方式:葛新建查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2022-11-21 13:41:38瀏覽次數(shù):231次

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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:115條

所在地區(qū):廣東深圳市

聯(lián)系人:葛新建 (銷(xiāo)售經(jīng)理)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

中道牌的非洲豬瘟病毒檢測(cè)試劑 非洲豬瘟檢測(cè)試劑廠家產(chǎn)品:估價(jià):850,規(guī)格:48T,產(chǎn)品系列編號(hào):3645

詳細(xì)介紹

非洲豬瘟病毒熒光 PCR 核酸檢測(cè)試劑盒(快提+預(yù)分裝)



使用說(shuō)明書(shū) 獸用 【操作步驟】

一、樣品制備

1、血液樣品:采集抗凝血(抗凝劑為 EDTA)或血清樣品,編號(hào)備用。

2、組織樣品:采集、肝臟、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品或軟蜱 0.1g(黃豆粒大小),眼科剪剪

碎于組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨,再加 1mL 生理鹽水混勻,4℃條件下 8000 rpm/分鐘離心 2

鐘,取上清液于滅菌離心管中,編號(hào)備用。

二、DNA 提取

取反應(yīng)液 A 20µL 分別加入到新的 1.5mL 離心管,加入抗凝血或血清或組織上清液 2 µL,混勻,室

溫(20℃左右)靜置 3 分鐘,加入反應(yīng)液 B 20 µL,吹打混勻即可,若為抗凝全血,則需 8000rpm/分鐘再

離心 2 分鐘后做為待檢 DNA 溶液。

三、PCR 擴(kuò)增

1、試劑準(zhǔn)備:根據(jù)當(dāng)次實(shí)驗(yàn)所需要的反應(yīng)數(shù)(反應(yīng)數(shù)=待檢樣本數(shù)+陰性對(duì)照+陽(yáng)性對(duì)照),取等量的

八聯(lián) PCR 反應(yīng)管,在室溫融化后,瞬離,并做好相應(yīng)標(biāo)記(操作過(guò)程要避光),剩余試劑放回-20℃冷凍

保存;

2、加樣擴(kuò)增:分別向 PCR 管中加入 5 µL 待檢樣本 DNA 或陰性對(duì)照或陽(yáng)性對(duì)照,混勻并瞬離,放入

熒光 PCR 儀上運(yùn)行以下程序:

熒光通道選擇 FAM,在 40 循環(huán)階段每個(gè)循環(huán)的 55℃時(shí)收集熒光信號(hào)。設(shè)置擴(kuò)增體系為 25 µL,同時(shí)

要選擇 passive reference quencher none 的模式。

(注:若熒光 PCR 儀( ABI7500)按說(shuō)明書(shū)中的反應(yīng)程序設(shè)置后因持溫時(shí)間短無(wú)法運(yùn)行,可將預(yù)擴(kuò)增和 PCR

擴(kuò)增條件變更為 95℃:5 秒 55℃:30 秒。)

【結(jié)果判定】

1、基線和閾值設(shè)定:參照儀器自動(dòng)產(chǎn)生或設(shè)定的閾值,手動(dòng)閾值參照陰性對(duì)照上線設(shè)定。

2、質(zhì)量控制:反應(yīng)結(jié)束后,陰性對(duì)照的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)無(wú)特定的擴(kuò)增曲線,Ct 值為>38 或無(wú);陽(yáng)性對(duì)照

Ct 值應(yīng)≤30.0,且明顯的擴(kuò)增曲線;否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

3、樣品判定:待檢樣品熒光信號(hào)有指數(shù)型增加,且結(jié)果顯示 Ct 值<35.0,報(bào)告為陽(yáng)性;未檢測(cè)到 Ct

值或 Ct 值>38 或無(wú)明顯擴(kuò)增曲線,則樣品判定為陰性。35≤Ct 值≤38 時(shí),復(fù)檢一次,重復(fù)結(jié)果為陽(yáng)性者判

定為陽(yáng)性,否則判定為陰性。

【注意事項(xiàng)】

1、實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本試劑盒說(shuō)明書(shū),嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行,在操作過(guò)程中對(duì)時(shí)間、試劑體積等精

確控制可以獲得的結(jié)果。

2、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格按照有關(guān)規(guī)定分區(qū)管理。各區(qū)間人員、器材、試劑及空氣流向應(yīng)有嚴(yán)格要求。

3、有關(guān)耗材確保潔凈、無(wú)菌,核酸提取完成后盡快進(jìn)入下一步試驗(yàn)或冷凍保存。

4、對(duì)于熒光 PCR 管要避免徒手或使用過(guò)的手套接觸,檢測(cè)過(guò)程中使用不帶熒光物質(zhì)一次性乳膠手套。

5、凍存試劑使用前應(yīng)于室溫下融化,瞬時(shí)離心使液體沉于管底,操作時(shí)應(yīng)注意避光,避免強(qiáng)

光暴露和長(zhǎng)時(shí)間光照。

6、樣品、陰性對(duì)照封蓋后,在通風(fēng)環(huán)境添加陽(yáng)性對(duì)照并及時(shí)封蓋,避免組分間及氣溶膠等假陽(yáng)性污染。

7、擴(kuò)增反應(yīng)完畢后的 PCR 管?chē)?yán)禁開(kāi)蓋,應(yīng)和產(chǎn)生的其它試驗(yàn)廢棄物一起及時(shí)收集,遠(yuǎn)離 PCR 實(shí)驗(yàn)室

進(jìn)行無(wú)害化處理。

【規(guī)格】48 頭份/盒。

【貯藏與有效期】-20℃以下避光保存,有效期 12 個(gè)月。

僅供獸醫(yī)診斷使用

關(guān)鍵詞:氣溶膠
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