美國BTX是專業(yè)的細胞融合、電穿孔儀的生產(chǎn)廠家。自從1983年起,苛求的科研工作者就已經(jīng)把BTX產(chǎn)品作為電融合、轉基因等應用領域的儀器。除了占世界的電融合、轉基因系統(tǒng)外,BTX的產(chǎn)品還包括多達25種相關的配件,其中有多種專業(yè)的電極,給用戶更多的選擇。
BTX還在網(wǎng)站建立了技術數(shù)據(jù)庫,提供超過5000份的參考目錄和600多份的protocols供科研工作者免費查閱。
ECM系列產(chǎn)品在轉基因的應用領域中得以廣泛的應用,其無以倫比的高性能得到了同行的厚愛。BTX的系列產(chǎn)品適用于動植物、細菌、酵母、哺乳動物、人類細胞(包括動物活體)的轉基因等操作,
體內(nèi)基因導入(IVGD) (系統(tǒng):ECM830)
在動物活體內(nèi)基因轉移的非病毒技術中,直接將質粒DNA注射進入肌肉內(nèi)是簡單、廉價及安全的。Aihara及Miyazaki(1998)次指出通過在肌肉內(nèi)將DNA注射與電穿孔相結合,可以將表達增強100倍。
Mir等人(1999)使用多種類型的電極將基因傳遞進入多種種屬的骨骼?。ù笫蟆⑿∈?、兔、猴)。他們的結果顯示通過使用電穿孔以及DNA注射:(1)基因轉移的效率大大增加了,只是表達增強2-4倍;(2)不同實驗之間的差別縮小了,而這正是單獨DNA注射的主要缺點;(3)表達持續(xù)時間很長(數(shù)月),這對于長期臨床應用非常重要;(4)不同種屬的不同的肌肉都有陽性的反應,說明廣泛的可用性;(5)基因表達非常特異僅在局部,而周圍組織則沒有影響到。這種技術成功用于其他組織,例如肝、睪丸、以及皮膚。
最近Vicat等人(1999)通過體內(nèi)電穿孔儀將基因傳遞如小鼠腦組織。與被稱為有力的腦組織基因轉移的非病毒載體的pCMV-luc與PolyEthylenlmine聯(lián)合的方法相比,電穿孔的效率要高50倍。Nishi等人證明使用電穿孔可以獲得有效的神經(jīng)膠質瘤基因轉移。Nishi還顯示對實體瘤進行電基因治療后腫瘤生長阻滯了50-90%。Dean等人將基因電導入完整的腸系膜動脈獲得了成功。電穿孔已經(jīng)被證實確實是進行體基因/藥物轉移方面一項有前途的技術,有許多新奇的用途。BTX公司特制的2針陣列電極、Genetrodes、卡鉗電極、Tweezertrodes提供將基因侵入性以及侵入性轉移入組織的方法。
卵內(nèi)基因轉移(IOGD) (系統(tǒng):ECM830)
Muramatsu等人(1997)比較了3種轉染方法用于將外源基因轉入早期雞胚進行表達。他發(fā)現(xiàn)與脂質體轉染及基因槍相比,電穿孔是的方法。Takeuchi等人(1999)使用電穿孔技術將早期雞胚轉染了tbx5及tbx4基因,以確定肢芽的翅/腿標志。
對于這種用途已經(jīng)開發(fā)出特用的電極。Genetrodes、L形狀針電極,被用于測定雞胚及靶向組織的特定區(qū)域。許多研究人員已經(jīng)轉染了眼、心或者肢體組織,方便了發(fā)育生物學方法的進一步研究。剛上市的足控開關具有遙控功能,是ECM830可以在不需要手操作的情況下進行激活,這對于卵內(nèi)、體內(nèi)以及體外胚胎用途非常重要。
體外胚胎基因轉移(IVEGD) (系統(tǒng):ECM830)
Tasaki等人(1999)討論了使用電穿孔在體外小鼠胚胎方面的運用。小鼠胚胎有柱狀的結構而且有比家禽更多胚胎培養(yǎng)基操作需求。有可能對胚胎進行電穿孔用于異位表達研究。在小鼠中后腦部的基因表達已經(jīng)被觀察。這個技術也用在交配后9.5天小鼠胚胎,以研究Hu基因在神經(jīng)分化中的功能。BTX為這些目的提供一種全新的電極:Genepaddles。
技術規(guī)格
工作狀況:具有開機自檢功能
接 口:數(shù)字式用戶接口
輸入電壓:110VAC/220Hz
充電時間:最長5秒(無延時)
電壓范圍:5-500V低壓工作模式連續(xù)可調/每次1V調進
20-3000V高壓工作模式/每次5V調進
脈寬選擇:10μs-999μs低壓工作模式/1μs精度
1ms-999ms高壓工作模式/1ms精度
1s-10s低壓工作模式/0.1s精度
10μs-600μs高壓工作模式/1μs精度
脈沖個數(shù):1-99
脈沖間隔:100ms-10s
安 全 性:抗短路保護設計
其它指標:電容量:4000μF
電 流 量:10μs 500A
物理參數(shù):尺寸:12.5"×12.25" ×5.5"(W×D×H)
重量:15磅(6.8公斤)
顯示:20×4位LCD液晶顯示屏
控制器:旋轉式電壓選擇鈕
按壓式電源開關及乒乓式觸發(fā)開關
串連接口:RS232和RS485
監(jiān)測: 能監(jiān)測顯示電壓(V)時間(t)脈沖數(shù)(n)