聚丙烯酰胺凝膠薄片35S、14C或3H的放射活性測定

1．用自顯影X線膠片作模板，切下含放射性目的蛋白的凝膠片段，已經(jīng)干燥但尚未固定的凝膠很容易操作。
2．將凝膠薄片放入放射性計(jì)數(shù)小瓶中。
3．用小量的水（20u1／1X 5mm薄片）膨脹凝膠薄片（室溫30min）。
4．或?qū)⒛z薄片溶解于1．0mi由19份30％的過氧化氫和1份14．8mol／L氫氧化銨組成的溶液中，37℃溫育過夜，然后加入水溶性閃爍液。
或加入10ml新鮮配制的氨／助溶劑／閃爍液（將0．5ml 14．8mol／LNH40H加10mlNCS助溶劑或Solusol內(nèi)，混合，加至100ml以甲苯作溶劑的閃爍液內(nèi)）。室溫下振搖溫育過夜（Ward，1970）。

聚丙烯酰胺凝膠薄片32P或125I放射活性測定

1．用自顯影x線膠片作模板，切下含放射性目的蛋白的凝膠片段。
2．將凝膠薄片放入放射性計(jì)數(shù)小瓶中，32p樣品可用Cerenkov法記數(shù)，125I樣品用γ計(jì)數(shù)器記數(shù)。
注：Cerenkov記數(shù)法的效率取決于樣品的體積，應(yīng)對(duì)相同大小的凝膠片段作比較。
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