新城疫傳統(tǒng)的診斷方法主要依賴于病毒的分離和鑒定。但由于疫苗的廣泛應(yīng)用，從現(xiàn)場分離到新城疫病毒或用各種方法檢測到新城疫病毒也不能肯定雞群發(fā)生的就是新城疫，因為分離到的新城疫病毒有可能是疫苗毒。要確定新城疫病毒毒株或分離物是哪一個毒力型，還必須進行系統(tǒng)的生物學(xué)試驗，測定毒力指數(shù)（MDT、ICPI、IVPl）。但這些試驗費時、費力、費錢，不適宜于臨床診斷應(yīng)用。新城疫病毒分子結(jié)構(gòu)和致病性關(guān)系研究的日益深入為新城疫特異性診斷技術(shù)，特別是從病原體角度建立株特異性鑒定技術(shù)的研究奠定了理論基礎(chǔ)，根據(jù)不同致病性新城疫病毒株存在的分子結(jié)構(gòu)差異（核苷酸序列差異和氨基酸序列差異）使得應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)、核酸探針技術(shù)和PCR技術(shù)建立各種特異、快速的新城疫診斷方法成為可能。

核酸探針技術(shù)是在已獲得的病毒特異片段上標(biāo)記放射性同位素或*作為探針而建立的一種分子雜交診斷方法，具有簡便、準(zhǔn)確、靈敏等顯著優(yōu)點。

1992年Jacecki-Black等利用特異性針對中發(fā)型和緩發(fā)型分離株的連接肽特性，設(shè)計了一個寡核苷酸，并用這個寡核苷酸作為探針進行狹縫印跡雜交，試驗證明該探針至少可檢出o．25一o．5／Lg的NDVRNA，病毒感染組織樣品和雞胚增殖均可用該辦法檢測，不足的是無法區(qū)分自然感染雞和免疫雞。

Jacecki-Black和King在用核苷酸探針檢測NDV的基礎(chǔ)上于1993年又建立了一種可以區(qū)分強毒株和弱毒株的同位素標(biāo)記寡聚核苷酸探針技術(shù)，他們檢測了36個分離株，該探針可以與所有強毒株雜交，而不與任何低毒力毒株結(jié)合，而且，探針與其他禽類病毒無交叉反應(yīng)+1998年Oherdorfer和Werner也報道建立了可以區(qū)分NDV的探針技術(shù)，該法可以對大量NDV樣品進行快速篩選。

Angela等（1998）利用RT—PCR擴增出362bp的包括F蛋白裂解位點序列的片段，制備成了相應(yīng)的探針，并用PCR產(chǎn)物同型特異性探針雜交來區(qū)分在德國流行的強弱毒株。
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