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CSA法的雙倍放大和連續(xù)放大

時(shí)間:2012-11-24閱讀:281
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CSA的循環(huán)使信號(hào)放大作用顯著增強(qiáng),與ELF技術(shù)結(jié)合應(yīng)用也相當(dāng)有效果,與常規(guī)IH&DAB或NBT/BCIP顯色劑結(jié)合用也可獲得進(jìn)一步的信號(hào)放大。

舉例來(lái)說(shuō),在*循環(huán)*—XX酪胺酰胺能沉積在靶目標(biāo)(抗原或核酸分子)上,下一步使用鏈霉親和素—HRP交聯(lián)物結(jié)合AlexaFluor酪胺酰胺或俄勒岡綠4488酪胺酰胺、太平洋藍(lán)酪胺酰胺,或再用一循環(huán)*—XX酪胺酰胺。大概這種放大可連續(xù)3個(gè)循環(huán),這樣可能會(huì)造成某些空間分辨率的損失。

先沉積在*標(biāo)記的探針結(jié)合位點(diǎn)的*酪胺酰胺,可使用HRP的鏈霉親和素交聯(lián)物進(jìn)一步放大,或使用堿性磷酸酶的鏈霉親和素交聯(lián)物,結(jié)合用ELF-97磷酸鹽繼續(xù)放大,可進(jìn)行低拷貝mRNA的超敏檢測(cè)(Breininger,2000)。

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