1．HAT選擇雜交瘤細(xì)胞  脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)PEG處理后形成多種細(xì)胞的混合體，只有脾細(xì)胞與骨髓細(xì)胞形成的雜交瘤細(xì)胞才有意義。在HAT選擇培養(yǎng)液中培養(yǎng)時(shí)，由于骨髓瘤細(xì)胞缺乏胸苷激酶或次黃嘌呤*核糖轉(zhuǎn)移酶，故不能生長(zhǎng)繁殖，而雜交瘤細(xì)胞含有上述兩種酶，在HAT選擇培養(yǎng)液中可以生長(zhǎng)繁殖。用HAT選擇培養(yǎng)1～2d內(nèi)將有大量瘤細(xì)胞死亡，3—4d后瘤細(xì)胞消失，雜交細(xì)胞形成小集落。HAT選擇培養(yǎng)液維持7一tod后應(yīng)換用HT培養(yǎng)液，再維持2周，改用一般培養(yǎng)液。在上述選擇培養(yǎng)期間，雜交瘤細(xì)胞布滿孔底l／10面積時(shí)，即可開始檢測(cè)特異性抗體，篩選出需要的雜交瘤細(xì)胞系。在選擇培養(yǎng)期間，一般每2～3d更換一半的培養(yǎng)液。