商品介紹：

公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

細(xì)胞凍存注意事項：
(1)  細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候，這時細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸，活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護劑的使用
細(xì)胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細(xì)胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3)  細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白4抗體  間隙連接蛋白31.1/GJB5抗體　英文名；Connexin 31.1

ADP核糖基化樣因子ARL3抗體  剪接體相關(guān)蛋白155抗體　英文名；SAP155

AF488標(biāo)記人CD25單克隆抗體  劍蛋白p80抗體　英文名；katanin p80

AF647標(biāo)記人CD158e1單克隆抗體  膠質(zhì)母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體　英文名；GBAS

AF680標(biāo)記的叉頭蛋白P3抗體  酵母肌動蛋白（內(nèi)參）抗體　英文名；Beta Actin (Yeast, Loading Control)

11號染色體開放閱讀框67抗體  核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1 （核內(nèi)參）重組兔單克隆抗體　英文名；YY1(Nuclear Loading Control)

14-3-3E蛋白抗體  黑色素瘤蛋白多糖4抗體　英文名；NG2

17β羥基類固醇脫氫酶11/17β-HSD11抗體  黑色素瘤相關(guān)抗原D4抗體　英文名；MAGD4

19號染色體開放閱讀框29抗體  環(huán)指蛋白212抗體　英文名；RNF212

1號染色體開放閱讀框105抗體  環(huán)指蛋白67抗體　英文名；NEURL

1號染色體開放閱讀框167抗體  磺胺抗體　英文名；Sulfadiazine

1號染色體開放閱讀框229抗體  活化轉(zhuǎn)錄因子4重組兔單克隆抗體　英文名；ATF4

1號染色體開放閱讀框96抗體  肌動蛋白結(jié)合蛋白2B抗體　英文名；CORO2B

20號染色體開放閱讀框177抗體  肌動蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體　英文名；SMARCD3

21號染色體開放閱讀框33抗體  肌球蛋白1B抗體　英文名；MYO1B

鋅指蛋白14抗體  小鼠抗人CD20單克隆抗體　英文名；human CD20

鋅指蛋白200抗體  心肌缺血預(yù)處理正調(diào)節(jié)蛋白2抗體　英文名；WDR26

鋅指蛋白24抗體  鋅指MIZ結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體　英文名；ZMIZ2

操作步驟:

(1) 細(xì)胞系培養(yǎng)：取6cm細(xì)胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。

(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)

A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。

B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細(xì)胞長滿之后，提取細(xì)胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。