當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> T24人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號 | A01X990 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
產(chǎn)品名稱 | T24人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 | 貨號 | A01X990 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | T24:T24 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
別稱 | T-24 |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 81歲 |
組織來源 | 膀胱;移行細(xì)胞癌 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡介 | T24細(xì)胞源自病人的轉(zhuǎn)移性細(xì)胞腺癌,對T24和相關(guān)細(xì)胞株有細(xì)胞毒性。T24細(xì)胞群體倍增時間為19小時,含ras(H-ras)癌基因。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | McCoy’s 5A+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~20-48小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
細(xì)胞凍存注意事項:
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達(dá)效率。
公司正在出售的產(chǎn)品:
APC標(biāo)記人CD36單克隆抗體 英文名;human CD36/APC 絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2/3抗體 英文名;MAPKAPK2/3
APC標(biāo)記人TCR α/β單克隆抗體 英文名;human TCR α/β/APC 死亡受體5抗體 英文名;DR5
APC標(biāo)記小鼠CD80單克隆抗體 英文名;mouse CD80/APC 四連接同源蛋白FJX1抗體 英文名;FJX1
ATP6蛋白抗體 英文名;MT-ATP6 髓鞘堿性蛋白/磷脂堿性蛋白抗體 英文名;MBP
ATP依賴RNA解旋酶DDX52抗體 英文名;DDX52 羧肽酶X(M14家族1)抗體 英文名;CPXM
ATP依賴解旋酶RENT1抗體 英文名;RENT1+hUPF1 英文名;Anthrax
B7-H4抗體 英文名;B7H4 唐氏綜合征臨界區(qū)域蛋白3抗體 英文名;DSCR3
磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體 CD34抗體
磷酸化蛋白激酶C zeta 抗體 CD48抗體
磷酸化丁酸鹽反應(yīng)因子1抗體 CD7重組兔單克隆抗體
磷酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3重組兔單克隆抗體 CENPBD1蛋白抗體
磷酸化紅細(xì)胞膜帶4.9蛋白抗體 Coilin蛋白抗體
磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 CROC4抗體
T24人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞磷酸化淋巴細(xì)胞衍生C-型凝集素抗體 Cy3標(biāo)記的網(wǎng)格蛋白重鏈抗體
磷酸化內(nèi)收蛋白gamma抗體 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體
磷酸化乳腺癌易感基因1抗體 DENND5A蛋白抗體
磷酸化雙皮質(zhì)素抗體 DISC1 C端抗體
口蹄疫病毒O型VP1單克隆抗體 Alexa Fluor? 647標(biāo)記人IL-1β單克隆抗體
跨膜蛋白173抗體 APC-Cy7標(biāo)記人CD127 (IL7R)單克隆抗體
跨膜蛋白9B抗體 APC標(biāo)記人CD103 (ITGAE)單克隆抗體
跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體 APC標(biāo)記人CD274 (B7-H1, PD-L1)單克隆抗體
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