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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TVB6小鼠維生素B6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | VB6小鼠維生素B6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Mouse Vitamin B6, VB6 Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-M64388 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
膜粘連蛋白10抗體英文全稱Octamer Binding Transcription Factor 4英文簡(jiǎn)稱43742檢測(cè)范圍212nmol/L-8ng/mL
前梯度同源蛋白2抗體英文全稱Interleukin 12 receptorβ2英文簡(jiǎn)稱IL-12Rβ2檢測(cè)范圍213nmol/L-40pg/mL
乙醛脫氫酶5抗體英文全稱Interleukin 17 Receptor英文簡(jiǎn)稱IL-17R檢測(cè)范圍214nmol/L-100pg/mL
通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體英文全稱Interleukin 18 Receptor英文簡(jiǎn)稱IL-18R檢測(cè)范圍215nmol/L-240pg/mL
激活素受體1B抗體英文全稱Interleukin 1β converting enzyme英文簡(jiǎn)稱ICE檢測(cè)范圍216nmol/L-240pg/mL
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體英文全稱Interleukin-1 family member 10英文簡(jiǎn)稱IL1F10檢測(cè)范圍217nmol/L-120pg/mL
胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體英文全稱IL-1sRⅡ英文簡(jiǎn)稱IL-1sRⅡ檢測(cè)范圍218nmol/L-200pg/mL
載脂蛋白A1抗體英文全稱interleukin 1 receptor associated kinase 1英文簡(jiǎn)稱IRAK1檢測(cè)范圍219nmol/L-8ng/mL
髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體英文全稱IL-22BP英文簡(jiǎn)稱IL-22BP檢測(cè)范圍220nmol/L-800pg/mL
腺瘤樣息肉抗體英文全稱Leukotriene B4 Receptor 1英文簡(jiǎn)稱BLT1;LTB4R1檢測(cè)范圍221nmol/L-480pg/mL
腺苷酸環(huán)化酶1抗體英文全稱Interleukin 12;23 p40 英文簡(jiǎn)稱IL-12;IL-23 p40檢測(cè)范圍222nmol/L-200pg/mL
雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體英文全稱Interleukin 13英文簡(jiǎn)稱IL-13檢測(cè)范圍223nmol/L-40pg/mL
淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端)英文全稱Interleukin 21 Receptor英文簡(jiǎn)稱IL-21R檢測(cè)范圍224nmol/L-800pg/mL
載脂蛋白C3抗體英文全稱Interleukin 26英文簡(jiǎn)稱IL-26檢測(cè)范圍225nmol/L-800pg/mL
腺苷酸環(huán)化酶2抗體英文全稱Interleukin 28A英文簡(jiǎn)稱IL-28A檢測(cè)范圍226nmol/L-240pg/mL
載脂蛋白E4抗體英文全稱Interleukin 32R英文簡(jiǎn)稱IL-32R檢測(cè)范圍227nmol/L-120pg/mL
日本乙型腦炎病(JEV)核酸檢測(cè)試劑盒)TRAF1 Blocking Peptide100 ug
豬水皰性口炎(VSV)核酸檢測(cè)試劑盒)PP2A C Subunit Blocking Peptide100 ug
戊型肝炎病(HEV)核酸檢測(cè)試劑盒)mTOR Blocking Peptide100 ug
口蹄疫病A型(FMDV-A)核酸檢測(cè)試劑盒)GSK-3β Blocking Peptide100 ul
口蹄疫病亞洲1型(FMDV-Asia1)核酸檢測(cè)試劑盒)BRCA2 (D9S6V) Rabbit mAb100 ug
腦心肌炎病(EMCV)核酸檢測(cè)試劑盒)AMPKβ1/2 Blocking Peptide1Kit
豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒)FastScan™ Phospho-Rb (Ser807/811) ELISA Kit100 ug
高致病性豬藍(lán)耳病病(PRRSV-M)核酸檢測(cè)試劑盒)Stat1 Blocking Peptide (9175 Specific)100 ug
VB6小鼠維生素B6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理EB病核抗原-3A抗體Jatrophane 5別名: 2,5,7,14-traacetoxy-3-benzoyloxy-8,15-dihydroxy-9-nicotinoyloxyjatropha-6(17),11E-diene分子式: C41H49NO14性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 南歐大戟;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
膠質(zhì)谷氨運(yùn)載蛋白1抗體Sculponeatin N別名: 分子式: C25H40O4性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 貝殼杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體Ailanthone別名: 分子式: C20H24O7性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗腫瘤;抗癌;臭椿;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體Sculponeatin A別名: 分子式: C20H24O6性狀: Cryst.純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 線紋香茶菜;貝殼杉烷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
外基質(zhì)蛋白1抗體Jatrophane 3別名: 2,5,14-Triacetoxy-3-benzoyloxy-8,15-dihydroxy-7-isobutyroyloxy-9-nicotinoyloxyjatropha-6(17),11E-diene分子式: C43H53NO14性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 南歐大戟;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
外胚層發(fā)育不良抗體Xerophilusin G別名: 分子式: C22H30O8性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 毛葉香茶菜;貝殼杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
E2 tag標(biāo)簽抗體Isosalvipuberulin別名: Isopuberulin分子式: C20H14O5性狀: Powder純度: 95.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
鐵螯合酶抗體Maoecrystal B別名: Rabdosianone II分子式: C22H28O6性狀: Cryst.純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 毛萼香茶菜;毛葉香茶菜;貝殼杉烷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
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