細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：

細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的消毒及布局

保持細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序，將所有物品置于直視范圍內(nèi)。

向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇，擦拭清潔進(jìn)行消毒。

在通風(fēng)櫥中部開(kāi)闊處放置細(xì)胞培養(yǎng)容器；移液器置于右前方易于取用；試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸?。辉嚬芗苤糜谥泻蟛?；小型容器置于左后部用于盛放廢液。

培養(yǎng)瓶/皿等物品的無(wú)菌操作

細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類(lèi)：

化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。

生物污染物，如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。

可通過(guò)充分了解污染源以及采用良好的無(wú)菌技術(shù)，降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。

交叉污染的確認(rèn)

為細(xì)胞換液時(shí)，要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入，而不是直接加到細(xì)胞中，以免損傷細(xì)胞，當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞株較為脆弱時(shí)尤其需要注意。

使用無(wú)菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時(shí)，每支吸管只能使用一次，以免交叉污染。

細(xì)胞傳代的時(shí)間把握

當(dāng)細(xì)胞呈指數(shù)增殖，貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞已占據(jù)所有可用基質(zhì)、沒(méi)有擴(kuò)增空間，或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞已超過(guò)培養(yǎng)基質(zhì)所支撐的能力，無(wú)法進(jìn)一步生長(zhǎng)時(shí)，細(xì)胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細(xì)胞密度維持在最佳水平，以便細(xì)胞繼續(xù)生長(zhǎng)，并且刺激進(jìn)一步增殖，必須對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代。

細(xì)胞培養(yǎng)的步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備

細(xì)胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細(xì)胞與基質(zhì)解離以及細(xì)胞質(zhì)空泡形成。

這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致，例如：培養(yǎng)物污染、細(xì)胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì)，或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。

變質(zhì)嚴(yán)重時(shí)將會(huì)成為不可逆的變化。

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CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISA