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貨號(hào)	FS-01S63347

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品，售后完善。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：超氧陰離子清除能力檢測(cè)試劑盒微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測(cè)方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63347
商品介紹：

測(cè)定意義

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一種自由基，可攻擊生物大分子，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等，使其交鏈或者斷裂，引起細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞，與機(jī)體衰老和病變有很密切的關(guān)系，清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關(guān)注。

測(cè)定原理：

AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子，與鹽酸羥胺反應(yīng)生成NO2－，NO2－與對(duì)氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物，在530nm處有特征吸收峰，樣品對(duì)超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負(fù)相關(guān)。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：

天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
小鼠Sestrin 3蛋白 (SESN3) 試劑盒Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體

小鼠性別決定區(qū)Y框蛋白3(SOX3) 試劑盒Human GP5(Plaet glycoprotein V) ELISA Kit肉棕櫚酰基轉(zhuǎn)移2抗體

小鼠性結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒Human KL(Klotho) ELISA Kit肉氧位甲基轉(zhuǎn)移抗體

小鼠唾液結(jié)合球蛋白樣凝集3(SIGLEC3) 試劑盒Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA KitIV型膠原α3結(jié)合蛋白抗體

小鼠唾液結(jié)合球蛋白樣凝集12(SIGLEC12)試劑盒 Human SEPT5(Septin-5) ELISA Kit肉棕櫚?；D(zhuǎn)移1B抗體

小鼠信號(hào)識(shí)別顆粒(SRP10)試劑盒Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA Kit膽27α羥化抗體

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)試劑盒Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA Kit膽24α7羥化抗體

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子2(STAT2)試劑盒Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA Kit色P450 4A1抗體

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)試劑盒Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit色P4504A22抗體（脂肪Ω羥化）

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)試劑盒Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit周期蛋白依賴性激抑制劑2D抗體

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子5A(STAT5A)試劑盒Human APLN(Apelin) ELISA Kit膽24S－羥化

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子6B(STAT6B)試劑盒Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit豬瘟病抗體

小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)試劑盒Human ITGB1(Integrin beta-1) ELISA Kit色c氧化亞型2抗體

小鼠Smad同源物1(Smad1)試劑盒Human MEP1A(Meprin A subunit alpha) ELISA Kit周期G2抗體

小鼠鳥(niǎo)酰轉(zhuǎn)移(OCT)試劑盒Human BMX(Cytoplasmic tyrosine-protein kinase BMX) ELISA Kit銅藍(lán)蛋白抗體
超氧陰離子清除能力檢測(cè)試劑盒微量法乙鈣 AR,99%3,5-二芐氧基甲 98%Anti-PEDF /FITC 熒光標(biāo)記色上皮源性因子抗體IgG

乙鈣 CP,98%3-羥基-2-甲 98%Anti-pEGFR(pTyr1068)/FITC 熒光標(biāo)記抗磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體IgG

二甲基亞砜 for HPLC, ≥99.7%2-異氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜烷 98%Anti-PEG3/FITC 熒光標(biāo)記PEG3蛋白抗體IgG

乙 AR,99.0%過(guò)氧化氫 3500 units/mg Anti-PEG10 /FITC 熒光標(biāo)記肝癌高表達(dá)基因抗體IgG

雙乙鈉 99%干冰,塊狀,146*88*20Anti-PENK/Enkephalin A/FITC 熒光標(biāo)記腦啡肽抗體IgG

乙鈉，三水 AR,99%氫氣減壓閥Anti-Peptide YY/PYY/FITC 熒光標(biāo)記酪酪肽抗體IgG

乙鈉，三水 GR,99.5%芐嘧磺隆分析標(biāo)準(zhǔn)品Anti-PEPT1/FITC 熒光標(biāo)記腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgG

乙鈉，三水 ACS,99.0-101%胃蛋白（豬源） 1：3000Anti-PEPT2 /FITC 熒光標(biāo)記腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體IgG