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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>> 吉姆薩染色液
貨號(hào) | FS-X9784 |
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產(chǎn)品介紹:
本品以進(jìn)口的吉姆薩色素、甲醇為主要原料,含*襯染劑,經(jīng)研磨配制而成,能呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞染色效果。經(jīng)常用于組織切片、血液和細(xì)胞涂片、細(xì)菌、染色體顯帶、原生動(dòng)物寄生蟲等染色。吉姆薩染色液由吉姆薩貯存液(10×)和磷酸鹽緩沖液組成,10×貯存液可以單獨(dú)使用,也可以1:9混合成工作液后使用。 吉姆薩色素是由天青Ⅱ與伊紅混合而成。吉姆薩染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同,吉姆薩染色液對(duì)胞漿著色力較強(qiáng),能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對(duì)血液和骨髓細(xì)胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對(duì)細(xì)胞核著色偏深,核結(jié)構(gòu)顯色不佳,故吉姆薩染液常與瑞氏染液聯(lián)合使用。 一、一步法涂片染色 1、吉姆薩工作液的配制: 按吉姆薩貯存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:9混合,即取1份吉姆薩儲(chǔ)存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為吉姆薩工作液,該工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。 2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1-3分鐘。 3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加吉姆薩工作液覆蓋涂片,室溫滴染。 4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。 5、干燥、鏡檢。 6、染色結(jié)果: 嗜酸性顆?!奂t色; 嗜堿性顆粒————紫藍(lán)色; 中性顆?!仙?/span> 二、兩步法涂片染色 1、吉姆薩工作液的配制: 按吉姆薩貯存液(10×):蒸餾水=1:4混合,即取1份的吉姆薩貯存液(10×)加入到4份的蒸餾水中充分混勻,即為吉姆薩工作液。吉姆薩工作液為即用型試劑,不易保存,即用即配。 2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定。 3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加適量吉姆薩工作液覆蓋涂片,室溫滴染。 4、加入等量磷酸鹽緩沖液,輕輕晃動(dòng)載玻片,室溫靜置。 5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。 |
中文名稱:吉姆薩染色液
英文名稱:Giemsa Stain Solution
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
貨號(hào):FS-X9784
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min; 2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜; 5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
淋巴細(xì)胞抗原75(LY75)英文名:LY75 胰羧肽A1抗體包裝5g
淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原2(LFA2)英文名:LFA2 羧肽A2抗體包裝1g
淋巴毒β(LTβ)英文名:LTβ 腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體包裝250mg
亮豐富重復(fù)LGI家族成員3(LGI3)英文名:LGI3 胰羧肽B1抗體包裝5g
亮豐富α2-糖蛋白1(LRG1)英文名:LRG1 維結(jié)合蛋白2抗體包裝1g
連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)英文名:CTNNβ1 2號(hào)染色體開放閱讀框80抗體包裝1g
粒細(xì)胞趨化蛋白2(GCP2)英文名:GCP2 磷化CD32B抗體包裝250mg
類(TPS)英文名:TPS 過敏C3(補(bǔ)體C3)抗體包裝5g
類固5α還原1(SRD5α1)英文名:SRD5α1 癌胚抗原相關(guān)粘附分子抗體包裝10mg
蘭尼定受體1(RYR1)英文名:RYR1 質(zhì)多聚腺結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
賴酰氧化樣蛋白2(LOXL2)英文名:LOXL2 半胱蛋白抑制劑7抗體包裝25g
賴酰氧化樣蛋白1(LOXL1)英文名:LOXL1 22號(hào)染色體開放閱讀框29抗體包裝5g
賴酰氧化(LOX)英文名:LOX 神經(jīng)表面蛋白F3包裝1g
賴tRNA合成(KARS)英文名:KARS 組織蛋白C抗體包裝5g
醌NADH脫氫1(NQO1)英文名:NQO1 半胱蛋白蛋白-4抗體包裝100g
: HBUM71385資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,含量測(cè)定中心體蛋白350kDa試劑盒紫草;lithospermic aci
干酪乳桿菌Lactobacillus│casei 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,喜樹提取中華肝吸蟲試劑盒紫堇靈;(+)-corynoline
豬鏈球菌Streptococcus│suis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品制瘤M受體試劑盒紫杉肽;
吉姆薩染色液蘇云金芽孢桿 3--5-甲基-4-載脂蛋白C1
淡青鏈霉 2-(二氟甲氧基)載脂蛋白C2
香菇 二甲基烯乙二酯載脂蛋白C3
黃色短桿 異丁香茅酯載脂蛋白E
三葉草根瘤 異丁正丁酯載脂蛋白E4
大腸埃希氏 一硫化四甲基秋蘭姆載脂蛋白J
果生鏈核盤 三丁基(1-乙氧基乙烯)錫再生胰島衍生1α;胰石蛋白;胰線蛋白
Paracoccus 坎利酮早期分泌抗原靶6
異常漢遜酵母 4-溴二苯并噻吩增殖核抗原抗體
露濕漆斑 2-基-3-氟吡啶粘蛋白;粘液5B
玫瑰色紅球 5--2,4-二甲氧基苯粘蛋白1
巨獸芽孢桿 5-溴-2-基吡啶粘蛋白17
肺炎鏈球 芐星頭孢匹林粘蛋白2
地衣芽孢桿 6-乙氧基煙粘蛋白5AC
清酒假絲酵母 6-乙氧基煙堿粘蛋白7
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